casus REPORT
een 56-jarige man met diabetes mellitus werd opgenomen op de operatieafdeling vanwege voetinfectie. Na debridement van een abces werd de ontlading naar het microbiologisch laboratorium voor kweek gestuurd.
Direct microscopisch onderzoek van het purulente materiaal toonde leukocyten en grampositieve cocci. Cultuur op 5% schapen bloed agar na ‘ s nachts incubatie leverde gladde, verhoogde, glinsterende, grijs-wit, beta-hemolytische kolonies., Het gramkleurige uitstrijkje van de kolonies onthulde grampositieve cocci in clusters. De catalase test uitgevoerd met 3% H2 O2 op een glasplaatje was herhaaldelijk negatief. Ondanks de catalase negativiteit, coagulase productie werd getest door een buis coagulase test en DNAase test werd gedaan op DNAase medium en waren positief, het identificeren van het organisme als S. aureus. De huidige stam verschilt van Staphylococcus saccharolyticus en Staphylococcus aureus subsp. anaerobius door zijn productie van klontering factor, zuur productie uit trehalose, mannose, en lactose en nitraat reductie (4).,
de identificatie van het isolaat als S. aureus subsp. aureus werd bevestigd door PCR-versterking van de nuc-en fem-genen (5). Om het mechanisme te identificeren dat verantwoordelijk is voor het gebrek aan catalase-activiteit, werd de nucleotidesequentie van het S. aureus catalase-gen in de catalase-negatieve stam versterkt door PCR met behulp van een set primers, Cat1 5′ ATAAATTGTGGGGATGAT3′ en Cat 2 5 ‘CATAAACTGCTCAACTACGC3’ (3).
totaal DNA van S. aureus werd geëxtraheerd met de cetyltrimethylammoniumbromide-methode na voorbehandeling van bacteriën met lysostafine (1 mg ml−1) gedurende 1 uur bij 37°C in Tris/EDTA/sucrose., PCR werd uitgevoerd in een volume van 50 µl met 50 ng genomisch DNA met reagentia en protocollen die door de fabrikant (Roche, Duitsland) werden geleverd. Thermo cycler reactie voorwaarden waren 1 min. bij 94°C, 1 min. bij 52°C en 1 of 1,5 min bij 72°C gedurende 30 cycli. Alle PCR-versterkingen omvatten een voorlopige denaturatie bij 94°C gedurende 10 minuten en een laatste incubatie bij 72°C gedurende 10 minuten. Amplified PCR producten werden geanalyseerd door elektroforese op 1% agarose gels. Het PCR-resultaat bevestigde dat dit isolaat een catalase-negatieve S. aureus stam is.,
de gevoeligheid van isolaat voor antibiotica werd bepaald met behulp van disk diffusie methode volgens de clsi (Clinical and Laboratory Standards Institute) richtlijnen (6). De stam bleek gevoelig te zijn voor imipenem, chlooramfenicol, amoxicilline, vancomycine en resistent tegen oxacilline, penicilline, ceftriaxon, erythromycine, clindamycine en amikacine.
isolaten van catalase-negatieve S. aureus zijn uiterst zeldzaam. Slechts enkele catalase-negatieve S. aureus stammen zijn gemeld (4, 7). Catalase is een heem-eiwitenzym dat waterstofperoxide afbreekt geproduceerd door fagocyten., De productie van catalase lijkt niet essentieel te zijn voor de groei van S. aureus in vitro en in vivo (4, 8) maar het is een afweermechanisme tegen vernietiging van het micro-organisme in fagocytaire cellen (2). Aan de andere kant is er een goede correlatie tussen Staphylococcus catalase activiteit en de letaliteit ervan bij muizen (8). Dit kan de lage frequentie van infectie verklaren veroorzaakt door catalase negatieve S. aureus stammen.
de klinische relevantie van catalase-negatieve S. aureus stammen vereist verder onderzoek. In eerdere rapporten, de catalase-negatieve S., aureusstammen werden geïsoleerd uit bloedmonsters, katheters, bronchiale secretiemonsters, zweren en andere wonden geassocieerd met infecties of nosocomiale endemieën (9-11). De werkelijke incidentie van catalase-negatieve S. aureus is echter onbekend omdat veel diagnostische laboratoria de catalase-test niet uitvoeren, maar Gramkleur, koloniale morfologie, de coagulasetest en andere biochemische tests gebruiken voor de identificatie van S. aureus., Concluderend, moeten clinici en microbiologen worden aangemoedigd om deze atypische spanningen en de besmettingen verbonden met hen te identificeren en te melden, om hun rol in pathogenese vast te stellen.