Madame Lelica

De oxidasetest wordt gebruikt om bacteriën te identificeren die cytochroom-c-oxidase produceren, een enzym van de bacteriële elektronentransportketen. Indien aanwezig oxideert de cytochroom-c-oxidase het reagens (tetramethyl-p-fenyleendiamine) tot (indofenolen) purperkleurig eindproduct. Wanneer het enzym niet aanwezig is, blijft het reagens verminderd en kleurloos.,

alle oxidase-positieve bacteriën zijn aeroob en kunnen zuurstof gebruiken als terminale elektronenacceptor in de ademhaling. Dit betekent niet dat het strikte aeroben zijn., Bacteriën die oxidase-negatief zijn kunnen anaërobe, aërobe of facultatieve zijn; het oxidase-negatieve resultaat betekent alleen dat deze organismen niet de cytochroom c-oxidase hebben die het testreagens oxideert. Ze kunnen respireren met behulp van andere oxidasen in elektronentransport.

doel van de Oxidasetest

Oxidasetest is het meest nuttig bij het screenen van kolonies waarvan wordt vermoed dat ze behoren tot de Enterobacteriaceae (alle negatief) en bij het identificeren van kolonies waarvan wordt vermoed dat ze behoren tot andere geslachten zoals Aeromonas, Pseudomonas, Neisseria, Campylobacter en Pasteurella (positief).,

testvoorschriften voor Oxidasetest: vochtig filtreerpapier met het substraat (1% tetramethyl-p-fenyleendiaminedihydrochloride), of commercieel bereide papierschijf, houten draad of platinadraad.,

verwachte resultaten van Oxidasetest

1. positief: ontwikkeling van donkerpaarse kleur (indofenolen) binnen 10 Seconden
2. negatief: afwezigheid van kleur

gewijzigde Oxidasetest (Microdase): Principe, Procedure en toepassingen

kwaliteitscontrole van Oxidasetest

bacteriesoorten die positieve en negatieve reacties vertonen, moeten met regelmatige tussenpozen als controle worden uitgevoerd. A. positieve controle: Pseudomonas aeruginosa
B.,met houten of platina loop en smeer in de papieren filter

Observeren geënte gebied van papier voor een verandering van de kleur diep blauw of paars binnen 10-30 seconden

Voorzorgsmaatregelen te worden genomen tijdens het uitvoeren van oxidase test:

1. gebruik geen Nikkel-basis lichtmetalen draden met chroom en ijzer (nichrome) het kiezen van de kolonie en het maken van uitstrijkjes, want dit kan geven vals-positieve resultaten
2. het Interpreteren van de resultaten binnen de 10 seconden, timing is cruciaal

Opmerking:

De oxidase test moet worden uitgevoerd vanaf 5% schapen bloed agar of een ander medium zonder de vergistbare suikers., Fermentatie van koolhydraten leidt tot verzuring van het medium (bv. lactose in MacConkey-Agar of Sucrose in TCBS), en een vals-negatieve oxidasetest kan resulteren als de omringende pH lager is dan 5,1. Subinoculatie op Voedingsagar is vereist voordat de oxidasetest kan worden uitgevoerd.

bij de identificatie van het vermoedelijke Vibrio cholerae-isolaat is het niet mogelijk een oxidasetest rechtstreeks uit een TCBS-cultuur uit te voeren, omdat het zuur dat wordt geproduceerd door de sucrose-fermenterende kolonies de oxidasereactie remt.,

Oxidasetestresultaten

bacteriële geslachten gekarakteriseerd als oxidasepositief omvatten Neisseria en Pseudomonas enz. Geslachten van de Enterobacteriaceae familie worden gekarakteriseerd als oxidase negatief.

naam van Oxidase – positieve bacteriën zijn: Mneomoics for Oxidase Positive Organisms-PVNCH (het is slechts een acroniem geïnspireerd door het beroemde mneomonic for Urease Positive organisms-PUNCH)

1. P: Pseudomonas spp
2. V: Vibrio cholerae
3. N: Neisseria spp
4. C: Campylobacter spp
5. H: Helicobacter spp/ Haemophilus spp.,
6. Aeromonas spp
7. Alcaligens