celtelling is een integraal onderdeel van het bepalen van celconcentraties voor beplating in kweek, het bepalen van de levensvatbaarheid van de cellen en het beoordelen van de resultaten van celisolatieprocedures. Het wordt geadviseerd om een eerste celtelling vóór celisolatie uit te voeren; dit aantal kan dan met de celtelling na celisolatie worden vergeleken om celterugwinning te berekenen., Daarnaast moet het aantal levensvatbare cellen worden uitgevoerd wanneer een afname van de levensvatbaarheid van de cellen kan worden verwacht, bijvoorbeeld bij het werken met cryopreserveerde cellen of cellen die ex vivo worden gemanipuleerd.
celtelling kan worden uitgevoerd met Trypan Blue of 3% azijnzuur met methyleenblauw. Bij het uitvoeren van een totaal aantal kerncellen wordt 3% azijnzuur met methyleenblauw aanbevolen. Azijnzuur lyseert de celmembranen en het methyleenblauw kleurt de blootgestelde kernen. Omdat rijpe rode bloedcellen geen kernen hebben, worden ze uitgesloten bij het tellen., Als alternatief wordt Trypan Blue aanbevolen voor het tellen van levensvatbare zoogdiercellen. Trypan Blue dringt het celmembraan binnen en komt zo in het cytoplasma van cellen met gecompromitteerde membranen (dode cellen) om ze blauw te kleuren. De levende cellen blijven intact en kunnen van dode cellen worden onderscheiden door hun vermogen om de blauwe kleurstof uit te sluiten. In dit geval zou men de intacte levensvatbare cellen tellen.
Dit protocol beschrijft hoe het totale aantal nucleïnehoudende cellen met 3% azijnzuur met methyleenblauw kan worden uitgevoerd, en hoe het aantal levensvatbare cellen door uitsluiting van Trypanblauwe kleurstof kan worden uitgevoerd., Additonal cell tellen middelen en sjablonen te helpen stroomlijnen uw analyses zijn ook beschikbaar.