récepteurs couplés aux protéines G
Les récepteurs couplés aux protéines G (GPCR) répondent aux stimuli extracellulaires, comme les hormones, par interaction avec une protéine G, transduisant un signal à travers la membrane dans l’intérieur cellulaire. Après l’activation du GPCR, les sous-unités Ga se lient au GTP et deviennent actives, activant davantage les facteurs de signalisation en aval comme l’enzyme adénylyl cyclase (AC), qui synthétise l’AMP cyclique (AMPc)., Les protéines G activées interagissent avec les facteurs de signalisation en aval pour modifier la production de seconds messagers tels que les inositolphosphates, le calcium et l’AMPc. Les GPCR qui activent la classe Gi des sous-unités Ga inhibent la production d’AMPc et les GPCR qui activent la classe Gs des sous-unités Ga activent la production d’AMPc. l’AMPc, à son tour, active la protéine kinase dépendante de l’AMPc, la protéine kinase A (PKA). La voie d’activation PKA est un exemple de cascade de transduction de signal, dans laquelle lier plusieurs événements de signalisation ensemble amplifie le signal d’origine à l’intérieur de la cellule., Pour chaque molécule GPCR activée, de nombreuses protéines G peuvent être activées, et chaque protéine G active peut synthétiser de nombreuses molécules d’AMPc, poursuivant la cascade vers le PKA et plus en aval.
Les GPCR sont très impliqués dans les fonctions pituicytes. Une altération de la signalisation a été démontrée dans les adénomes hypophysaires. Des mutations ponctuelles de Gsa ont été démontrées dans les tumeurs hypophysaires sécrétrices de GH .
Pertuit et coll. ont largement analysé les altérations de la Gsa dans les adénomes sécréteurs de GH.
les seules mutations jusqu’à présent identifiées et observées sans équivoque dans 30 à 40% des tumeurs sécrétrices de GH concernent l’oncogène gsp., Malgré les grandes variations individuelles des ARNm Gsa, le niveau de protéines Gsa est toujours plus faible dans les tumeurs gsp positives (gsp+) par rapport aux tumeurs GSP négatives (gsp−). Il a déjà été suggéré que l’activation du Gsa induit un changement conformationnel qui empêche sa fixation aux membranes et augmente son taux de dégradation, ce qui pourrait impliquer le protéasome .
en plus de l’oncogène gsp, une surexpression de la protéine WtGsa a été observée dans un sous− ensemble d’adénomes gsp. Environ 60% de ces tumeurs SPG expriment des niveaux élevés de Gsa par rapport aux cellules hypophysaires humaines normales., Le locus GNAS (guanine nucleotide binding protein (G protein), Alpha stimulating activity polypeptide 1), qui cartographie sur le chromosome humain 20q13, consiste en une région complexe avec de multiples transcrits épissés alternatifs codant pour plusieurs produits protéiques. Dans la plupart des tissus humains, le Gsa est exprimé bialléliquement mais, dans des tissus spécifiques, le Gsa est imprimé . Dans les tumeurs hypophysaires, les transcrits codant le Gsa sont exprimés de manière monoallélique, principalement à partir de l’allèle maternel . Dans presque tous les cas d’adénomes somatotrophes gsp+, la mutation activatrice GNAS se produit sur l’allèle maternel actif ., Il est bien connu que les dérégulations de l’empreinte génomique peuvent avoir un impact sur les niveaux d’expression des gènes et peuvent donc participer à la tumorigenèse. Une forte relaxation d’impression, avec une expression paternellement dérivée de Gsa, n’a été trouvée que dans les tumeurs gsp. Ainsi, d’autres mécanismes qui pourraient expliquer la surexpression de WtGsa restent à identifier.
Les protéines Gs couplent la stimulation hormonale de divers récepteurs de surface cellulaire à l’activation de L’AC . L’activation AC conduit à la génération de l’AMPc second messager intracellulaire, qui stimule le PKA, l’effecteur principal de l’AMPc., Les phosphodiestérases (eDP) contribuent à la complexicité et à la spécificité de la voie de l’AMPc en hydrolysant l’AMPc. Il est maintenant bien établi que les camps sont compartimentés en cellules. En réponse à une élévation de l’AMPc, les eDP peuvent être activées directement par la PKA (c’est-à-dire la régulation rapide de la rétroaction) et/ou par l’induction de la transcription du gène de L’EDP (c’est-à-dire la régulation à long terme) . Ainsi, l’équilibre spatio-temporel entre les activités PKA et PDE est un déterminant dans le contrôle de la signalisation cAMP.,
en l’absence d’inhibiteurs de la PDE, aucune différence dans les taux d’AMPc intracellulaires entre les adénomes gsp+ et gsp− n’a été décelable . Persani et coll. a démontré que les transcriptions de PDE4C et 4D, ainsi que celles de PDE8 , étaient surexprimées dans les tumeurs gsp+, qui étaient corrélées avec une augmentation de sept fois de L’activité de PDE. Les deux protéines nucléaires, la protéine CREB et le répresseur précoce de l’AMPc inductible (ICER), sont les cibles finales principales et les mieux caractérisées de l’AMPc. Les niveaux d’ARNm des facteurs de transcription CREB et ICER sont tous deux augmentés dans les tumeurs gsp+., Les niveaux de CREB phosphorylés sont similaires dans les deux types de tumeurs, bien que le blocage de la PDE induit une augmentation de P-CREB (PhosphoCREB) dans les tumeurs gsp+. Ces résultats suggèrent qu’une augmentation de l’activité de la PDE pourrait contrecarrer l’activation de la voie de l’AMPc et pourrait avoir un impact sur le phénotype des tumeurs gsp+.
outre les altérations de la voie de l’AMPc dans les tumeurs gsp+, plusieurs éléments de preuve suggèrent également l’existence d’altérations de la voie de l’AMPc dans les adénomes sécréteurs de GH surexprimant WtGsa. Des niveaux relativement élevés d’ARNm CREB ou ICER ont été observés dans certaines tumeurs gsp .,
la surexpression de WtGsa améliore l’accumulation intracellulaire d’AMPc et stimule la voie d’AMPc (niveau de P-CREB). Une augmentation de la transcription dépendante de CREB est également observée à la fois en présence de l’oncogène gsp et avec la surexpression de WtGsa dans les cellules GH3 .
afin de déterminer avec précision le rôle des altérations de la Gsa dans l’initiation et la progression des adénomes sécréteurs de GH, Pertuit et al., réalisé une étude sur les cellules hypophysaires, constatant que l’induction de l’expression de la spg oncogène lance une augmentation considérable de l’activité AC, qui est associée à une augmentation de l’ampc intracellulaire niveau. Une activation faible mais durable de L’AC, associée à une légère augmentation du niveau d’AMPc, est également observée en réponse à une surexpression de WtGsa. l’AMPc diminue progressivement malgré l’expression continue du transgène, ce qui suggère une implication potentielle des EDP., Cela peut représenter un deuxième mécanisme de rétroaction en plus de la régulation posttranscriptionnelle de l’oncogène gsp .
ces mutations empêchent l’activité de GSA GTPase, ayant pour résultat l’activation constitutive indépendante du ligand GHRH de l’AMPc, qui a comme conséquence l’activation de GH-transcriptional et la prolifération de somatotrophe par l’intermédiaire d’un CREB dans le promoteur de GH .
de manière significative, des quantités plus élevées de SER133PHOSPHORYLÉ, et donc de CREB activé, ont été rapportées dans certaines tumeurs hypophysaires sécrétrices de GH par rapport aux niveaux trouvés dans les tumeurs non fonctionnelles (NF)., Cette activité accrue de CREB était évidente même dans les tumeurs qui ne manifestaient pas de mutation Gsa. Cela suggère que L’activation du CREB peut se produire via un mécanisme indépendant du Gs . Il est possible que les polypeptides Stimulateurs / inhibiteurs et les hormones stéroïdes libérés par l’hypothalamus et les organes endocriniens périphériques puissent altérer l’expression des gènes hypophysaires et la sécrétion hormonale .