Madame Lelica

le test d’oxydase est utilisé pour identifier les bactéries qui produisent la cytochrome C oxydase, une enzyme de la chaîne de transport d’électrons bactérienne. Lorsqu’elle est présente, la cytochrome C oxydase oxyde le réactif (tétraméthyl-p-phénylènediamine) en (indophénols) produit final de couleur Pourpre. Lorsque l’enzyme n’est pas présente, le réactif reste réduit et est incolore.,

Toutes les bactéries qui sont oxydase positive sont aérobies, et peut utiliser l’oxygène comme accepteur terminal d’électrons dans la respiration. Cela ne signifie pas qu’ils sont des aérobies strictes., Les bactéries qui sont oxydase-négatives peuvent être anaérobies, aérobies ou facultatives; le résultat oxydase négatif signifie simplement que ces organismes n’ont pas la cytochrome C oxydase qui oxyde le réactif d’essai. Ils peuvent respirer en utilisant d’autres oxydases dans le transport d’électrons.

but du test D’oxydase

le test D’oxydase est très utile dans le dépistage des colonies soupçonnées d’être L’une des Enterobacteriaceae (toutes négatives) et dans l’identification des colonies soupçonnées d’appartenir à d’autres genres tels que Aeromonas, Pseudomonas, Neisseria, Campylobacter et Pasteurella (positives).,

conditions D’essai pour l’essai D’oxydase: Papier filtre humide avec le substrat (dichlorhydrate de tétraméthyl-p-phénylènediamine à 1%), ou disque de papier préparé commercialement, fil de bois ou fil de platine.,

résultats attendus du test D’oxydase

1. positif: développement d’une couleur Pourpre Foncé (indophénols) en 10 Secondes
2. négatif: Absence de couleur

Test D’oxydase modifié (Microdase): Principe, procédure et utilisations

contrôle de la qualité du Test D’oxydase

Les espèces bactériennes présentant des réactions positives et négatives doivent être exécutées comme témoins à intervalles fréquents. Les éléments suivants sont suggérés:
A. témoin positif: Pseudomonas aeruginosa
B.,avec boucle en bois ou en platine et frottis dans le papier filtre

observer la zone inoculée du papier pour un changement de couleur en bleu profond ou violet dans les 10-30 secondes

précaution à prendre lors de l’exécution du test d’oxydase:

1. N’utilisez pas de fils en alliage à base de Nickel contenant du chrome et du fer (nichrome) pour sélectionner la colonie et faire le frottis car cela pourrait donner des résultats faussement positifs
2. interpréter les résultats dans les 10 secondes, le timing est critique

remarque:

le test d’oxydase doit être effectué à partir d’une gélose à 5% de sang de mouton ou d’un autre milieu sans sucre fermentescible., La Fermentation des glucides entraîne l’acidification du milieu (par exemple, le lactose dans la gélose MacConkey ou le saccharose dans les TCBS), et un test d’oxydase faussement négatif peut en résulter si le pH environnant est inférieur à 5,1. Une Subinoculation sur gélose nutritive est nécessaire avant que le test d’oxydase puisse être effectué.

lors de l’identification de L’isolat suspecté de Vibrio cholerae, il n’est pas possible d’effectuer un test d’oxydase directement à partir d’une culture de TCBS car l’acide produit par les colonies de fermentation du saccharose inhibera la réaction d’oxydase.,

résultats des tests D’oxydase

les genres bactériens caractérisés comme oxydase positive comprennent Neisseria et Pseudomonas, etc. Les genres de la famille des Enterobacteriaceae sont caractérisés comme oxydase négative.

Nom des bactéries positives à L’oxydase sont: Mneomoics pour les organismes positifs à L’oxydase – PVNCH (c’est juste un acronyme inspiré du célèbre mneomonic pour les organismes positifs à L’uréase-PUNCH)

1. P: Pseudomonas spp
2. V: Vibrio cholerae
3. N: Neisseria spp
4. C: Campylobacter spp
5. H: Helicobacter spp/ Haemophilus spp.,
6. Aeromonas spp
7. Alcaligens