rapport de cas
un homme de 56 ans souffrant de diabète sucré a été admis au service de chirurgie en raison d’une infection du pied. Après le débridement d’un abcès, la décharge a été envoyée au Laboratoire de microbiologie pour culture.
l’examen microscopique Direct du matériel purulent a montré des leucocytes et des cocci gram-positifs. La Culture sur gélose à 5% de sang de mouton après incubation pendant une nuit a donné des colonies bêta-hémolytiques lisses, surélevées, luisantes, gris-blanc., Le frottis Gram-coloré des colonies a révélé des cocci gram positifs en grappes. Le test de catalase effectué avec 3% H2 O2 sur une lame de verre s’est révélé négatif à plusieurs reprises. Malgré la négativité de la catalase, la production de coagulase a été testée par un test de coagulase en tube et un test de DNAase a été effectué sur un milieu de DNAase et a été positif, identifiant L’organisme comme S. aureus. La souche présente diffère de Staphylococcus saccharolyticus et Staphylococcus aureus subsp. anaerobius par sa production de facteur d’agglutination, la production d’acide à partir de tréhalose, mannose, et la réduction de lactose et de nitrate (4).,
l’identification de L’isolat comme S. aureus subsp. aureus a été confirmé par l’amplification par PCR des gènes nuc et fem (5). Pour identifier le mécanisme responsable de l’absence d’activité catalase, la séquence nucléotidique du gène catalase de S. aureus dans la souche catalase négative a été amplifiée par PCR à l’aide d’un ensemble d’amorces, Cat1 5’TATAAATTGTGGAGGGATGAT3’ et Cat 2 5’TCATAAACTGCTCAACTACGC3’ (3).
L’ADN Total de S. aureus a été extrait par la méthode du bromure de cétyle triméthyl ammonium après un prétraitement des bactéries avec de la lysostaphine (1 mg ml−1) pendant 1 h à 37°C dans le Tris/EDTA/saccharose., La PCR a été réalisée dans un volume de 50 µl contenant 50 ng D’ADN génomique avec des réactifs et des protocoles fournis par le fabricant (Roche, Allemagne). Les conditions de réaction du thermocycleur étaient de 1 min. à 94°C, 1 min. à 52°C et 1 ou 1,5 min à 72°C pendant 30 cycles. Toutes les amplifications PCR comprenaient une dénaturation préliminaire à 94°C pendant 10 min et une incubation finale à 72°C pendant 10 min. Les produits de PCR amplifiés ont été analysés par électrophorèse sur des gels d’agarose à 1%. Le résultat de la PCR a confirmé que cet isolat est une souche de S. aureus catalase négative.,
la sensibilité de l’isolat aux antibiotiques a été déterminée à l’aide de la méthode de diffusion sur disque selon les lignes directrices du CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) (6). La souche est sensible à l’imipénem, au chloramphénicol, à l’amoxicilline, la vancomycine et résistant à l’oxacilline, la pénicilline, la ceftriaxone, l’érythromycine, la clindamycine et à l’amikacine.
les isolats de S. aureus à catalase négative sont extrêmement rares. Seules quelques souches de S. aureus catalase négatives ont été signalées (4, 7). La Catalase est une enzyme protéique de l’hème qui décompose le peroxyde d’hydrogène produit par les phagocytes., La production de catalase ne semble pas essentielle à la croissance de S. aureus in vitro et in vivo (4, 8) mais c’est un mécanisme de défense contre la destruction du micro-organisme dans les cellules phagocytaires (2). D’autre part, il existe une bonne corrélation entre l’activité de la catalase staphylococcique et sa létalité chez la souris (8). Cela peut expliquer la faible fréquence d’infection causée par des souches de S. aureus catalase négatives.
la pertinence clinique des souches de S. aureus catalase-négatives nécessite une étude plus approfondie. Dans les rapports précédents, la catalase négative S., des souches d’aureus ont été isolées à partir d’échantillons de sang, de cathéters, d’échantillons de sécrétions bronchiques, d’ulcères et d’autres plaies associées à des infections ou à des endémies nosocomiales (9-11). Cependant, l’incidence réelle de S. aureus à catalase négative est inconnue car de nombreux laboratoires de diagnostic n’effectuent pas le test de catalase mais utilisent la coloration de Gram, la morphologie coloniale, le test de coagulase et d’autres tests biochimiques pour l’identification de S. aureus., En conclusion, les cliniciens et les microbiologistes doivent être encouragés à identifier et à signaler ces souches atypiques et les infections qui leur sont associées, afin d’établir leur rôle dans la pathogenèse.