G-Receptores Acoplados à Proteína
G-receptores acoplados à proteína (Broadband) responder a estímulos extracelulares, como hormônios, pela interação com uma proteína G, transducing um sinal através da membrana para o interior celular. Após a ativação do GPCR, as subunidades Ga se ligam ao GTP e se tornam ativas, ativando ainda mais fatores sinalizadores a jusante como a enzima adenylyl cyclase (AC), que sintetiza o AMP-cíclico (cAMP)., As proteínas G ativadas interagem com fatores de sinalização a jusante para alterar a produção de segundos mensageiros, tais como inositolfosfatos, cálcio e acampamento. As GPCRs que ativam a classe Gi de subunidades Ga inibem a produção do campo e as GPCRs que ativam a classe Gs de subunidades Ga ativam a produção do campo. cAMP, por sua vez, ativa a proteína cinase dependente do acampamento, a proteína cinase A (PKA). A via de ativação do PKA é um exemplo de uma cascata de transdução de sinal, na qual atar vários eventos de sinalização juntos amplifica o sinal original dentro da célula., Para cada molécula GPCR ativada, muitas proteínas G podem ser ativadas, e cada proteína G ativa pode sintetizar muitas moléculas de campo, continuando a cascata para PKA e mais abaixo.as GPCRs estão altamente envolvidas nas funções da pituicite. A sinalização deficiente foi demonstrada em adenomas da pituitária. Foram demonstradas mutações do ponto Gsa em tumores pituitários secretores de GH .Pertuit et al. analisaram amplamente alterações Gsa em adenomas secretores de GH.
As únicas mutações até agora inequivocamente identificadas e observadas em 30-40% dos tumores secretores de GH dizem respeito ao SPG oncogene., Apesar das grandes variações individuais de mRNAs Gsa , o nível de proteínas Gsa é sempre mais baixo em SPG positivo (SPG+) em comparação com tumores SPG negativo (SPG−). Tem sido sugerido anteriormente que a ativação do Gsa induz uma mudança conformacional que impede a sua ligação às membranas e aumenta a sua taxa de degradação, o que pode envolver o proteosoma .
além do SPG oncogene, observou− se uma sobreexpressão da proteína WtGsa num subconjunto de GSP-adenomas. Aproximadamente 60% destes tumores gsp expressam níveis elevados de Gsa em comparação com as células pituitárias humanas normais., O Gnas locus (proteína G de ligação do nucleótido da guanina), que mapeia o cromossoma humano 20q13, consiste numa região complexa com múltiplas transcrições splicadas alternativas que codificam múltiplos produtos proteicos. Na maioria dos tecidos humanos, a Gsa é bialelicamente expressa mas, em tecidos específicos, a Gsa é impressa . Nos tumores da hipófise, as transcrições de codificação Gsa são expressas monoalelicamente, predominantemente a partir do alelo materno . Em quase todos os casos de adenomas somatotróficos SPG+, a mutação activadora da GNAS ocorre no Alelo materno activo ., É bem conhecido que as desregulações de imprinting genômico podem ter impacto nos níveis de expressão do gene e assim podem participar na tumorigénese. Um relaxamento imprinting forte, com uma expressão paternalmente derivada de Gsa, foi encontrado apenas em SPG− tumores. Assim, outros mecanismos que poderiam explicar a sobreexpressão do WtGsa continuam por identificar.proteínas Gs algumas estimulações hormonais de vários receptores da superfície celular para a activação da AC . A ativação do AC leva à geração do campo intracelular de segunda mensageira, que estimula o PKA, o principal efetor do campo., As fosfodiesterases (PDEs) contribuem para a complexidade e especificidade da Via do campo por hidrolisamento do campo. Está agora bem estabelecido que o campo é compartimentalizado em células. Em resposta a uma elevação do campo, o PDEs pode ser ativado diretamente pelo PKA (isto é, regulação de retorno rápido) e/ou por indução da transcrição do gene PDE (isto é, regulação de longo prazo) . Assim, o equilíbrio espaciotemporal entre as atividades PKA e PDE é determinante no controle da sinalização do campo.,na ausência de inibidores da PDE, não foi detectável qualquer diferença nos níveis intracelulares entre o SPG+ e o SPG− adenomas . Persani et al. demonstrou que as transcrições de PDE4C e 4D, bem como as de PDE8, eram sobreexpressas em tumores SPG+, que estavam correlacionadas com um aumento de sete vezes na atividade PDE. As duas proteínas nucleares, a proteína CREB e o compressor indutível cAMP early repressor (ICER), são os principais e mais bem caracterizados alvos finais do acampamento. Os níveis de mRNA dos fatores de transcrição CREB e ICER são ambos aumentados nos tumores SPG+., Os níveis de CREB fosforilado são semelhantes nos dois tipos de tumores, embora o bloqueio PDE induza um aumento no P-CREB (Fosfocreb) nos tumores SPG+. Estes resultados sugerem que um aumento da actividade PDE poderia neutralizar a activação da Via do campo e pode ter um impacto no fenótipo dos tumores SPG+.
além de alterações da Via do campo em tumores gsp+, várias linhas de evidência também sugerem a existência de alterações da Via do campo em adenomas secretores de GH sobre-expressando WtGsa. Foram observados níveis relativamente elevados de CRB ou ICER mRNAs em alguns tumores do SPG .,
A sobre-expressão do WtGsa aumenta a acumulação intracelular no campo e estimula a via do campo (nível P-CREB). Observa-se igualmente um aumento da transcrição dependente do CREB tanto na presença do SPG oncogene como com a sobre-expressão do WtGsa nas células de GH3 .
a fim de determinar com precisão o papel das alterações de Gsa no início e progressão dos adenomas secretores de GH, Pertuit et al., realizou um estudo sobre células pituitárias, descobrindo que a indução da expressão do gsp oncogene inicia um aumento considerável na atividade AC, que está associada a um aumento no nível intracelular do campo. Uma ativação fraca mas duradoura do AC, associada a um ligeiro aumento do nível do campo, também é observada em resposta à Sobre-expressão do WtGsa. cAMP diminui progressivamente, apesar da expressão transgênica contínua, sugerindo um potencial envolvimento dos PDEs., Isto pode representar um segundo mecanismo de feedback, para além da regulamentação pós-transição do SPG oncogene .
estas mutações inibem a actividade da Gsa GTPase, resultando na activação constitutiva do cAMP independente do ligando GHRH, o que resulta na activação transcripcional da GH e na proliferação somatotrófica através de uma CREB no promotor da GH .
significativamente, quantidades mais elevadas de CREB ser 133-fosforilado e, portanto, ativado, têm sido relatadas em alguns tumores pituitários secretores de GH em comparação com os níveis encontrados em tumores não-funcionais (NF)., Esta atividade CREB aumentada foi evidente mesmo em tumores que não manifestaram uma mutação Gsa. Isto sugere que a ativação CREB pode ocorrer através de um mecanismo independente do Gs . É possível que os polipeptídeos estimuladores/inibitórios e as hormonas esteróides libertadas pelo hipotálamo e pelos órgãos endócrinos periféricos possam alterar a expressão do gene pituitário e a secreção hormonal .