fallrapport
en 56-årig man med diabetes mellitus togs in på operationsavdelningen på grund av fotinfektion. Efter debridering av en abscess skickades urladdningen till mikrobiologilaboratoriet för kultur.
Direkt mikroskopisk undersökning av det purulenta materialet visade leukocyter och gram-positiva kocker. Kultur på 5% fårblod agar efter natten inkubation gav jämn, upphöjd, glittrande, gråvit, beta-hemolytiska kolonier., Den Gramfärgade smeten av kolonierna avslöjade gram-positiva kocker i kluster. Katalastestet som utfördes med 3% H2 O2 på en glasskiva var upprepade gånger negativt. Trots katalasens negativitet testades koagulasproduktionen genom ett rörkoagulas-test och Dnaastest gjordes på Dnaasmediet och var positivt och identifierade organismen som S. aureus. Den nuvarande stammen skiljer sig från Staphylococcus saccharolyticus och Staphylococcus aureus subsp. anaerobius genom sin produktion av klumpfaktor, syraproduktion från trehalos, mannos och laktos och nitratreduktion (4).,
identifieringen av isolatet som S. aureus subsp. aureus bekräftades genom PCR-förstärkning av nuc-och fem-generna (5). För att identifiera den mekanism som är ansvarig för brist på katalasaktivitet förstärktes nukleotidsekvensen av S. aureus-katalasgenen i den katalasnegativa stammen av PCR med hjälp av en uppsättning primers, Cat1 5′ TATAAATTGGGAGGGATGAT3′ och Cat 2 5 ’TCATAAACTGCTCAACTACGC3’ (3).
totalt DNA från S. aureus extraherades med cetyltrimetylammoniumbromid efter förbehandling av bakterier med lysostafin (1 mg ml-1) för 1 h vid 37°C i Tris/EDTA/sackaros., PCR utfördes i en 50 µl volym innehållande 50 ng genomiskt DNA med reagens och protokoll som levererades av tillverkaren (Roche, Tyskland). Termo cykler reaktionsförhållanden var 1 min. vid 94°C, 1 min. vid 52°C och 1 eller 1,5 min vid 72°C i 30 cykler. Alla PCR-förstärkningar inkluderade preliminär denaturering vid 94 ° C under 10 min och en slutlig inkubation vid 72 ° C under 10 min. Förstärkta PCR-produkter analyserades genom elektrofores på 1% agarosgeler. PCR-resultatet bekräftade att detta isolat är en katalas-negativ S. aureus-stam.,
isolatets mottaglighet för antibiotika bestämdes med hjälp av diskdiffusionsmetod enligt CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) riktlinjer (6). Stammen befanns vara känslig för imipenem, kloramfenikol, amoxicillin, vankomycin och resistent mot oxacillin, penicillin, ceftriaxon, erytromycin, klindamycin och amikacin.
isolat av katalas-negativ S. aureus är extremt sällsynta. Endast ett fåtal katalasnegativa S. aureus-stammar har rapporterats (4, 7). Katalas är ett heme protein enzym som sönderdelar väteperoxid som produceras av fagocyter., Produktionen av katalas verkar inte vara väsentlig för tillväxten av S. aureus in vitro och in vivo (4, 8) men det är en försvarsmekanism mot förstöring av mikroorganismen i fagocytiska celler (2). Å andra sidan finns det god korrelation mellan stafylokockkatalasaktivitet och dess dödlighet i mus (8). Detta kan förklara den låga frekvensen av infektion orsakad av katalas negativa S. aureus-stammar.
den kliniska relevansen av katalasnegativa S. aureus-stammar kräver ytterligare undersökningar. I tidigare rapporter, katalas-negativ S., aureus-stammar isolerades från blodprov, katetrar, bronkialsekretionsprover, sår och andra sår i samband med infektioner eller nosokomiala endemiker (9-11). Den verkliga incidensen av katalas-negativ S. aureus är emellertid okänd eftersom många diagnostiska laboratorier inte utför katalastestet utan använder Gram-fläck, kolonial morfologi, koagulastestet och andra biokemiska tester för identifiering av S. aureus., Sammanfattningsvis måste kliniker och mikrobiologer uppmuntras att identifiera och rapportera dessa atypiska stammar och de infektioner som är förknippade med dem för att fastställa deras roll i patogenesen.