oxidastestet används för att identifiera bakterier som producerar cytokrom C-oxidas, ett enzym i bakterieelektrontransportkedjan. När det är närvarande oxiderar cytokrom C-oxidaset reagenset (tetrametyl-p-fenylendiamin) till (indofenoler) lila färg slutprodukt. När enzymet inte är närvarande, förblir reagenset reducerat och är färglöst.,
alla bakterier som är oxidas-positiva är aeroba och kan använda syre som en terminal elektron acceptor i andning. Det betyder inte att de är strikta aerober., Bakterier som är oxidas-negativa kan vara anaeroba, aeroba eller fakultativa; det oxidasnegativa resultatet betyder bara att dessa organismer inte har cytokrom C-oxidaset som oxiderar testreagensen. De kan respirera med andra oxidaser vid elektrontransport.
syftet med Oxidastest
Oxidastest är mest användbart vid screeningkolonier som misstänks vara en av Enterobacteriaceae (alla negativa) och vid identifiering av kolonier som misstänks tillhöra andra släkten såsom Aeromonas, Pseudomonas, Neisseria, Campylobacter och Pasteurella (positiva).,
testkrav för Oxidastest: fuktigt filterpapper med substratet (1% tetrametyl-p-fenylendiamindihydroklorid) eller kommersiellt beredd pappersskiva, trätråd eller platinatråd.,
förväntade resultat av Oxidastest
- positiv: utveckling av mörk lila färg (indofenoler) inom 10 sekunder
- negativ: frånvaro av färg
modifierat Oxidastest (Mikrodas): princip, procedur och användning
kvalitetskontroll av Oxidastest
bakteriearter som visar positiva och negativa reaktioner bör köras som kontroller med täta intervall. Följande föreslås:
A. positiv kontroll: Pseudomonas aeruginosa
B.,i filterpapper
försiktighet som skall vidtas när du utför oxidas test:
- använd inte Nickel-bas legeringstrådar som innehåller krom och järn (nichrome) för att plocka kolonin och göra smeta eftersom detta kan ge falska positiva resultat
- tolka resultaten inom 10 sekunder, timing är kritisk
- p: Pseudomonas spp
- v: Vibrio cholerae
- n: Neisseria spp
- c: Campylobacter spp
- H: Helicobacter spp / Haemophilus spp.,
- Aeromonas spp
- Alcaligens
Obs:
oxidastestet måste utföras från 5% fårblodagar eller ett annat medium utan fermenterbart socker., Fermentering av kolhydrater resulterar i försurning av mediet (t.ex. laktos i Agar eller sackaros i TCBS), och ett falskt negativt oxidastest kan resultera om det omgivande pH är under 5.1. Subinokulering på näringsagar krävs innan oxidastestet kan utföras.
under identifieringen av misstänkt Vibrio cholerae-isolat är det inte möjligt att utföra ett oxidastest direkt från en TCBS-kultur eftersom syran som produceras av sackarosfermenterande kolonier kommer att hämma oxidasreaktionen.,
Oxidastestresultat
Bakteriegenera karakteriserad som oxidaspositiv inkluderar Neisseria och Pseudomonas etc. Släkten av Enterobacteriaceae-familjen kännetecknas som oxidasnegativ.
namn på oxidaspositiva bakterier är: MNEOMOICS för Oxidaspositiva organismer – PVNCH (det är bara en akronym inspirerad av den berömda Mneomonic för Ureaspositiva organismer-PUNCH)