raport de caz
un bărbat în vârstă de 56 de ani cu diabet zaharat a fost internat în secția de Chirurgie din cauza infecției piciorului. După debridarea unui abces, descărcarea a fost trimisă la laboratorul de microbiologie pentru Cultură.examinarea microscopică directă a materialului purulent a arătat leucocite și cocci gram-pozitivi. Cultura pe Agar de sânge de oaie 5% după incubarea peste noapte a dat colonii netede, ridicate, strălucitoare, alb-gri, beta-hemolitice., Frotiul Gram-colorat al coloniilor a dezvăluit cocci gram pozitivi în clustere. Testul catalazei efectuat cu 3% H2 O2 pe o lamelă de sticlă a fost în mod repetat negativ. În ciuda negativității catalazei, producția de coagulază a fost testată printr-un test de coagulază cu tub, iar testul ADN a fost efectuat pe mediul de ADN și a fost pozitiv, identificând organismul ca S. aureus. Tulpina actuală diferă de Staphylococcus saccharolyticus și Staphylococcus aureus subsp. anaerobius prin producția sa de factor de aglomerare, producția de acid din trehaloză, manoză și reducerea lactozei și nitraților (4).,identificarea izolatului ca S. aureus subsp. aureus a fost confirmat prin amplificarea PCR a genelor nuc și fem (5). Pentru a identifica mecanismul responsabil pentru lipsa activității catalazei, secvența de nucleotide de S. aureus gena catalazei în catalaza-negative tulpina a fost amplificat prin PCR cu ajutorul unui set de primeri, Cat1 5’TATAAATTGTGGAGGGATGAT3 și Pisica 2 5’TCATAAACTGCTCAACTACGC3′ (3).
ADN−ul Total din S. aureus a fost extras prin metoda bromurii de cetil trimetil amoniu după pretratarea bacteriilor cu lizostafină (1 mg ml-1) timp de 1 oră la 37°C în Tris/EDTA / zaharoză., PCR a fost efectuat într-un volum de 50 µl conținând 50 ng ADN genomic cu reactivi și protocoale furnizate de producător (Roche, Germania). Condițiile de reacție termocicler au fost de 1 min. la 94°C, 1 min. la 52°C și 1 sau 1,5 min la 72°C timp de 30 de cicluri. Toate amplificările PCR au inclus denaturarea preliminară la 94°C timp de 10 minute și o incubare finală la 72°C timp de 10 minute. Produsele PCR amplificate au fost analizate prin electroforeză pe geluri de agaroză 1%. Rezultatul PCR a confirmat că acest izolat este o tulpină catalazică negativă S. aureus.,sensibilitatea izolatului la antibiotice a fost determinată utilizând metoda difuziei discului conform ghidurilor CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) (6). Tulpina sa dovedit a fi sensibilă la imipenem, cloramfenicol, amoxicilină, vancomicină și rezistentă la oxacilină, penicilină, ceftriaxonă, eritromicină, clindamicină și Amikacină.izolatele catalazei negative S. aureus sunt extrem de rare. Au fost raportate doar câteva tulpini catalazice negative de S. aureus (4, 7). Catalaza este o enzimă proteică heme care descompune peroxidul de hidrogen produs de fagocite., Producția de catalază nu pare a fi esențială pentru creșterea S. aureus in vitro și in vivo (4, 8), dar este un mecanism de apărare împotriva distrugerii microorganismului în celulele fagocitare (2). Pe de altă parte, există o corelație bună între activitatea catalazei stafilococice și letalitatea acesteia la șoarece (8). Acest lucru poate explica frecvența scăzută a infecției cauzate de tulpinile catalazice negative S. aureus.relevanța clinică a tulpinilor catalazice negative de S. aureus necesită investigații suplimentare. În rapoartele anterioare, catalaza negativă S., tulpinile aureus au fost izolate din probe de sânge, catetere, probe de secreție bronșică, ulcere și alte plăgi asociate cu infecții sau endemice nosocomiale (9-11). Cu toate acestea, adevărata incidență a catalazei negative S. aureus este necunoscută, deoarece multe laboratoare de diagnostic nu efectuează testul catalazei, ci utilizează pata Gram, morfologia colonială, testul coagulazei și alte teste biochimice pentru identificarea S. aureus., În concluzie, clinicienii și microbiologii trebuie încurajați să identifice și să raporteze aceste tulpini atipice și infecțiile asociate acestora, pentru a stabili rolul lor în patogeneză.