Celulă de numărare este o parte integrantă de determinare a concentrației de celule pentru placare în cultură, determinarea viabilității celulare și evaluarea rezultatelor de celule procedurile de izolare. Se recomandă efectuarea unui număr inițial de celule înainte de izolarea celulelor; acest număr poate fi apoi comparat cu numărul de celule după izolarea celulelor pentru a calcula recuperarea celulelor., În plus, numărul de celule viabile trebuie efectuat atunci când se poate aștepta o scădere a viabilității celulare, de exemplu, atunci când se lucrează cu celule crioconservate sau celule manipulate ex vivo.
numărarea celulelor poate fi efectuată utilizând Albastru Trypan sau Acid Acetic 3% cu albastru de metilen. Atunci când se efectuează un număr total de celule nucleate, se recomandă Acid Acetic 3% cu albastru de metilen. Acidul Acetic lizează membranele celulare, iar albastrul de metilen pătează nucleele expuse. Deoarece celulele roșii din sânge mature nu au nuclee, ele sunt excluse la numărare., Alternativ, albastrul Trypan este recomandat pentru numărarea celulelor viabile de mamifere. Albastrul Trypan pătrunde în membrana celulară, astfel intră în citoplasma celulelor cu membrane compromise (celule moarte) pentru a le pata albastru. Celulele vii rămân intacte și pot fi distinse de celulele moarte prin capacitatea lor de a exclude colorantul albastru. În acest caz, s-ar număra celulele viabile intacte.
acest protocol descrie modul de efectuare a numărului total de celule nucleate cu Acid Acetic 3% cu albastru de metilen și modul de efectuare a numărului de celule viabile prin excluderea colorantului Albastru Trypan., De asemenea, sunt disponibile resurse și șabloane suplimentare de numărare a celulelor pentru a vă eficientiza testele.