relatório de caso
um homem de 56 anos com diabetes mellitus foi admitido na enfermaria da cirurgia devido a infecção do pé. Após a remoção de um abcesso, a descarga foi enviada para o laboratório de microbiologia para cultura.o exame microscópico directo do material purulento revelou leucócitos e COCC positivos em gramas. Cultura em 5% de ágar de sangue de ovelha após a incubação da noite produziu colónias suaves, elevadas, cintilantes, brancas cinzentas, beta-hemolíticas., A mancha Gram-manchada das Colónias revelou gram positivo cocci em aglomerados. O teste da catalase realizado com 3% H2 O2 numa lâmina de vidro foi repetidamente negativo. Apesar da negatividade da catalase, a produção de coagulase foi testada através de um teste de coagulase tubular e o teste DNAase foi realizado em meio DNAase e foi positivo, identificando o organismo como S. aureus. A presente estirpe difere de Staphylococcus saccharolyticus e Staphylococcus aureus subsp. anaeróbio pela sua produção de Factor de aglomeração, produção de ácido a partir de trealose, manose e redução de lactose e nitrato (4).,
a identificação do isolado como S. aureus subsp. aureus foi confirmado pela amplificação PCR dos genes nuc e fem (5). Para identificar o mecanismo responsável pela falta de actividade da catalase, a sequência nucleótida do gene da S. aureus catalase na estirpe catalase-negativa foi amplificada por PCR utilizando um conjunto de iniciadores, Cat1 5’TATAAATTGGAGGGATGATGAT3′ e Cat 2 5’TRATAAACTGCTCAACTACGC3′ (3).o ADN Total de S. aureus foi extraído pelo método do brometo de Cetil trimetilamónio após pré−tratamento de bactérias com lisostafina (1 mg ml-1) durante 1 h a 37°C em Tris/EDTA/sacarose., A PCR foi realizada num volume de 50 µl contendo 50 ng de ADN genómico com reagentes e protocolos fornecidos pelo fabricante (Roche, Alemanha). As condições de reacção do termociclador foram de 1 min. a 94 ° C, durante 1 min. a 52 ° C e 1 ou 1,5 min a 72°C durante 30 ciclos. Todas as amplificações PCR incluíram desnaturação preliminar a 94 ° C durante 10 minutos e uma incubação final a 72°C durante 10 minutos. Os produtos de PCR amplificados foram analisados por electroforese em géis de agarose a 1%. O resultado da PCR confirmou que este isolado é uma estirpe S. aureus catalase-negativa.,
a susceptibilidade do isolado aos antibióticos foi determinada pelo método da difusão em disco de acordo com as orientações do CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) (6). A estirpe foi considerada sensível ao imipenem, cloranfenicol, amoxicilina, vancomicina e resistente à oxacilina, penicilina, ceftriaxona, eritromicina, clindamicina e amikacina.isolados de S. aureus catalase-negativo são extremamente raros. Apenas foram notificadas algumas estirpes de S. aureus catalase-negativas (4, 7). Catalase é uma enzima proteína heme que decompõe peróxido de hidrogênio produzido por fagócitos., A produção da catalase não parece ser essencial para o crescimento de S. aureus in vitro e in vivo (4, 8), mas é um mecanismo de defesa contra a destruição do microorganismo em células fagocíticas (2). Por outro lado, existe uma boa correlação entre a actividade catalásica estafilocócica e a sua letalidade no rato (8). Isto pode explicar a baixa frequência de infecção causada pelas estirpes de S. aureus negativas da catalase.
a relevância clínica das estirpes de S. aureus catalase-negativas requer uma investigação mais aprofundada. Em relatórios anteriores, o catalase-negativo S., as estirpes aureus foram isoladas a partir de amostras de sangue, cateteres, amostras de secreção brônquica, Úlceras e outras feridas associadas a infecções ou endemias nosocomiais (9-11). No entanto, a verdadeira incidência de S. aureus catalase-negativo é desconhecida porque muitos laboratórios de diagnóstico não realizam o teste da catalase, mas usam Gram stain, morfologia colonial, o teste da coagulase, e outros testes bioquímicos para a identificação de S. aureus., Em conclusão, os médicos e microbiologistas devem ser encorajados a identificar e comunicar estas estirpes atípicas e as infecções associadas a elas, a fim de estabelecer o seu papel na patogênese.