Madame Lelica

test oksydazy służy do identyfikacji bakterii, które produkują oksydazę cytochromu c, enzym bakteryjnego łańcucha transportu elektronów. Gdy występuje, oksydaza cytochromu c utlenia odczynnik (tetrametylo-P-fenylenodiamina) do (indofenoli) purpurowego produktu końcowego. Gdy enzym nie jest obecny, odczynnik pozostaje zredukowany i jest bezbarwny.,

wszystkie bakterie, które są oksydazo-dodatnie, są tlenowe i mogą używać tlenu jako końcowego akceptora elektronów w oddychaniu. Nie oznacza to, że są to ścisłe aeroby., Bakterie, które są oksydazo-ujemne mogą być beztlenowe, tlenowe lub fakultatywne; wynik ujemny oksydazy oznacza tylko, że te organizmy nie mają oksydazy cytochromu c, która utlenia testowy odczynnik. Mogą one powstawać przy użyciu innych oksydaz w transporcie elektronów.

cel testu oksydazy

Test oksydazy jest najbardziej pomocny w badaniach przesiewowych Kolonii podejrzanych o przynależność do Enterobacteriaceae (wszystkie negatywne) oraz w identyfikacji Kolonii podejrzanych o przynależność do innych rodzajów, takich jak Aeromonas, Pseudomonas, Neisseria, Campylobacter i Pasteurella (pozytywne).,

wymagania testowe dla testu oksydazy: wilgotny papier filtracyjny z podłożem (1% dichlorowodorku tetrametylo-p-fenylenodiaminy), lub komercyjnie przygotowany dysk papierowy, drut Drewniany lub drut platynowy.,

oczekiwane wyniki testu oksydazy

1. pozytywne: rozwój ciemnofioletowego koloru (indofenoli) w ciągu 10 sekund
2. negatywne: brak koloru

zmodyfikowany Test oksydazy (Mikrodaza): zasada, procedura i zastosowania

Kontrola jakości testu oksydazy

gatunki bakterii wykazujące pozytywne i negatywne reakcje powinny być przeprowadzane jako kontrole w częstych odstępach czasu. Zasugerowano:
A. kontrola pozytywna: Pseudomonas aeruginosa
B.,z drewnianą lub platynową pętlą i rozmazem w bibule filtracyjnej

Obserwuj zaszczepiony obszar papieru w celu zmiany koloru na głęboki niebieski lub fioletowy w ciągu 10-30 sekund

środki ostrożności, które należy podjąć podczas wykonywania testu oksydazy:

1. nie używaj drutów ze stopu niklu zawierających chrom i żelazo (nichrome), aby wybrać kolonię i rozmazać, ponieważ może to dać fałszywie pozytywne wyniki
2. interpretować wyniki w ciągu 10 sekund, Czas jest krytyczny
6. /li>

Uwaga:

Test oksydazy należy wykonać z 5% agaru krwi owczej lub innego medium bez fermentowalnego cukru., Fermentacja węglowodanów powoduje zakwaszenie pożywki (np. laktoza w agarze Macconkeya lub sacharoza w TCBS), a fałszywie ujemny wynik testu oksydazy może wynikać, jeśli otaczające pH jest poniżej 5.1. Subinokulacja na agarze odżywczym jest wymagana przed wykonaniem testu oksydazy.

podczas identyfikacji podejrzewanego izolatu Vibrio cholerae nie jest możliwe wykonanie testu oksydazy bezpośrednio z hodowli TCBS, ponieważ kwas wytwarzany przez kolonie fermentujące sacharozę hamuje reakcję oksydazy.,

wyniki testu oksydazy

rodzaje bakterii charakteryzujące się dodatnim wynikiem oksydazy to Neisseria i Pseudomonas itp. Rodzaje z rodziny Enterobacteriaceae są scharakteryzowane jako oksydazy ujemne.

nazwa bakterii oksydazo dodatnich to: Mneomoiki dla organizmów Oksydazo dodatnich – PVNCH (to tylko akronim inspirowany słynnym mneomonikiem dla organizmów Ureazo dodatnich-PUNCH)

1. P: Pseudomonas spp
2. V: Vibrio cholerae
3. N: Neisseria spp
4. C: Campylobacter spp
5. H: Helicobacter spp/ Haemophilus spp.,
6. Aeromonas spp
7. Alcaligens