Madame Lelica

liczenie komórek jest integralną częścią wyznaczania stężeń komórek do galwanizacji w hodowli, określania żywotności komórek i oceny wyników procedur izolacji komórek. Zaleca się wykonanie początkowej liczby komórek przed izolacją komórek; liczba ta może być następnie porównana z liczbą komórek po izolacji komórek w celu obliczenia odzysku komórek., Dodatkowo, żywotne liczby komórek powinny być wykonywane, gdy można się spodziewać zmniejszenia żywotności komórek, na przykład podczas pracy z komórkami krioprezerwowanymi lub komórkami manipulowanymi ex vivo.
zliczanie komórek można wykonać za pomocą błękitu Trypanowego lub 3% kwasu octowego z błękitem metylenowym. Podczas wykonywania całkowitej liczby nukleonów zaleca się 3% kwasu octowego z błękitem metylenowym. Kwas octowy usuwa błony komórkowe, a błękit metylenowy plami odsłonięte jądra. Ponieważ Dojrzałe krwinki czerwone brak jąder, są one wykluczone podczas liczenia., Alternatywnie, Niebieski Trypan jest zalecany do liczenia żywych komórek ssaków. Błękit trypanowy przenika przez błonę komórkową, w ten sposób wchodzi do cytoplazmy komórek o uszkodzonych błonach (martwych komórkach), aby zabarwić je na niebiesko. Żywe komórki pozostają nienaruszone i można je odróżnić od martwych komórek poprzez ich zdolność do wykluczenia niebieskiego barwnika. W tym przypadku można policzyć nienaruszone żywe komórki.
w protokole tym opisano, jak wykonać całkowitą liczbę komórek jąderkowych kwasem octowym 3% z błękitem metylenowym oraz jak wykonać żywotną liczbę komórek poprzez wykluczenie barwnika niebieskiego Trypanu., Dostępne są również dodatkowe zasoby zliczania komórek i szablony, które pomagają usprawnić testy.