stosowanie antystreptolizyny O (ASO) w diagnostyce ostrej infekcji paciorkowcowej grupy A jest rzadko wskazane, chyba że pacjent otrzymał antybiotyki, które spowodowałyby ujemny wynik posiewu. Istnieją pewne ograniczenia stosowania testu ASO w tych okolicznościach ze względu na opóźnienie i osłabienie odpowiedzi immunologicznej po wczesnej antybiotykoterapii.,
fałszywie wysokie miano można uzyskać z surowicami, które są zanieczyszczone przez niektóre organizmy bakteryjne podczas transportu lub przechowywania oraz u pacjentów z chorobami wątroby, u których obecność wysokich stężeń lipoprotein w surowicy może naśladować aktywność przeciwciał.
chociaż test antystreptolizyny O (ASO) jest dość wiarygodny, wykonanie anty-DNazy jest uzasadnione z dwóch głównych powodów. Po pierwsze, odpowiedź ASO nie jest uniwersalna. Podwyższone miano ASO występuje w surowicach około 85% osób z gorączką reumatyczną; miano ASO pozostaje normalne u około 15% osób z chorobą., To samo dotyczy innych testów przeciwciał paciorkowcowych: znaczna część osób z normalnymi mianami przeciwciał dla 1 testu będzie miała podwyższone miany przeciwciał dla innego testu. Tak więc, procent fałszywie ujemnych może być zmniejszona przez wykonywanie 2 lub więcej testów przeciwciało. Po drugie, zakażenia skóry, w przeciwieństwie do zakażeń gardła, są związane ze słabą odpowiedzią ASO. U pacjentów z ostrym kłębuszkowym zapaleniem nerek po zakażeniu skóry (liszajec) występuje osłabiona odpowiedź immunologiczna na streptolizynę O., U takich pacjentów zaleca się wykonanie alternatywnego testu na obecność przeciwciał paciorkowcowych, takiego jak anty-Dnaza B.