kasuistikk
En 56 år gammel mann med diabetes mellitus ble innlagt til operasjon menigheten på grunn av foten infeksjon. Etter debridement av en svulst, utslipp ble sendt til mikrobiologisk laboratorium for kultur.
Direkte mikroskopisk undersøkelse av purulent materialet viste leukocytter og gram-positive cocci. Kultur på 5% sheep blood agar etter natten inkubasjon gitt glatt, hevet, glinsende, grå-hvit, beta-hemolytiske kolonier., Den Gram-farget utstryk av koloniene avslørt gram positive cocci i klynger. Den catalase test utført med 3% H2 O2 på en glass-slide ble gjentatte ganger negative. Til tross for den catalase negativitet, coagulase-produksjon ble testet av et rør coagulase-test og DNAase testen ble gjort på DNAase medium og var positive, identifisere organismen som S. aureus. Den nåværende belastning skiller seg fra Staphylococcus saccharolyticus og Staphylococcus aureus subsp. anaerobius av sin produksjon av klumping faktor, syre produksjon fra trehalose, mannose, og laktose og nitrat reduksjon (4).,
identifisering av isolere som S. aureus subsp. aureus ble bekreftet av PCR-amplifikasjon av nuc og fem gener (5). For å identifisere mekanismen ansvarlig for mangel på catalase aktivitet, nukleotid-sekvensen av S. aureus catalase gen i catalase-negative belastningen ble forsterket ved PCR ved hjelp av et sett med primere, Cat1 5’TATAAATTGTGGAGGGATGAT3′ og Katten 2 5’TCATAAACTGCTCAACTACGC3′ (3).
Totale DNA fra S. aureus ble hentet av cetyl trimethyl ammonium bromide metode etter forbehandling av bakterier med lysostaphin (1 mg ml−1) for 1 time ved 37°C i Tris/EDTA/sukrose., PCR ble utført i en 50 µl volum som inneholder 50 ng genomisk DNA med reagenser og protokoller er levert av produsenten (Roche, Tyskland). Thermo cycler reaksjon forholdene var 1 min. ved 94°C, 1 min. på 52°C og 1 eller 1,5 min ved 72°C i 30 sykluser. Alle PCR-amplifikasjoner inkludert foreløpige denaturering ved 94°C i 10 min og en siste inkubering ved 72°C i 10 min. Forsterket PCR-produktene ble analysert ved elektroforese på 1% agarose-gel. PCR-resultat bekreftet at dette er isolere en catalase-negative S. aureus belastning.,
mottakelighet av isolere mot antibiotika som ble fastsatt ved hjelp av disk diffusjon metode i henhold til CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) retningslinjer (6). Belastningen ble funnet å være sensitive overfor imipenem, kloramfenikol, amoxicillin, vankomycin og motstandsdyktig mot oxacillin, penicillin, ceftriaxone, erytromycin, clindamycin, og amikacin.
Isolater av catalase-negative S. aureus er ekstremt sjeldne. Bare et par catalase-negative S. aureus stammer har blitt rapportert (4, 7). Catalase er en heme protein enzym som spaltes hydrogen peroxide produsert av phagocytes., Produksjon av catalase synes ikke å være avgjørende for vekst av S. aureus in vitro og in vivo (4, 8), men det er en forsvarsmekanisme mot ødeleggelse av mikroorganismen i phagocytic celler (2). På den annen side, det er god korrelasjon mellom stafylokokk catalase aktivitet og dens dødeligheten i mus (8). Dette kan forklare den lave frekvensen av infeksjon forårsaket av catalase negative S. aureus stammer.
Den kliniske relevansen av catalase-negative S. aureus stammer krever videre undersøkelser. I tidligere rapporter, catalase-negative S., aureus stammer ble isolert fra blod prøver, katetre, bronkial sekresjon prøver, magesår og andre sår og skader som er assosiert med infeksjoner eller nosokomiale endemics (9-11). Imidlertid, den sanne insidensen av catalase-negative S. aureus er ukjent fordi mange diagnostiske laboratorier ikke utføre catalase testen, men bruk gramfarging, koloniale morfologi, de coagulase-test, og andre biokjemiske tester for identifisering av S. aureus., I konklusjonen, klinikere og microbiologists må oppmuntres til å identifisere og rapportere disse atypiske stammer og infeksjoner assosiert med dem, for å etablere sin rolle i patogenesen.