oksidase-test er brukt for å identifisere bakterier som produserer cytokrom c oksidase, et enzym av bakterielle elektrontransportkjeden. Når de er til stede, cytokrom c oksidase oxidizes reagens (tetramethyl-p-phenylenediamine) til (indophenols) lilla farge sluttproduktet. Når enzymet er ikke til stede, reagens er fortsatt redusert og fargeløs.,

Mekanisme av Cytokrom Oksidase Reaksjon

Alle bakterier som er oksidase-positive er aerobic, og kan bruke oksygen som en terminal electron akseptor i åndedrett. Dette betyr IKKE at de er strenge aerobes., Bakterier som er oksidase-negative kan være anaerob, aerobic, eller facultative; den oksidase negativt resultat betyr bare at disse organismene ikke har cytokrom c oksidase som oxidizes testen reagens. De kan respire med andre oxidases i electron transport.

Formålet med Oksidase test

Oksidase test er mest nyttig i screening kolonier som er mistenkt for å være en av Enterobacteriaceae (alle negative) og i å identifisere kolonier som er mistenkt for å tilhøre andre slekter som Aeromonas, Pseudomonas, Neisseria, Campylobacter, og Pasteurella (positiv).,

Test krav til Oksidase test: Fuktig filter papir med underlaget (1% tetramethyl-p-phenylenediamine dihydrochloride), eller kommersielt forberedt papir disk, parkett wire eller platinum-wire.,

Forventede resultater av Oksidase test

  1. Positive: Utvikling av mørk lilla farge (indophenols) i løpet av 10 sekunder
  2. Negative: Fravær av farge

Endret Oksidase Test (Microdase): Prinsipp, Prosedyre og Bruker

kvalitetskontroll av Oksidase Test

bakteriearter som viser positive og negative reaksjoner som bør kjøres som kontroller med jevne mellomrom. Følgende er foreslått:
A. Positiv kontroll: Pseudomonas aeruginosa
B.,med tre-eller platina-loop og smøre på filterpapir

  • Observere inokulert området av papir til en fargeendring til dype blå eller lilla i 10-30 sekunder
  • Forholdsregler for å bli tatt mens du utfører oksidase test:

    1. bruk ikke Nikkel-base-legering ledninger som inneholder krom og jern (nichrome) å plukke kolonien og gjøre smøre da dette kan gi falske positive resultater
    2. Tolke resultatene i løpet av 10 sekunder, timing er kritisk

    Merk:

    oksidase testen må utføres fra 5% sheep blood agar eller et annet medium, uten en gjæringsdyktig sukker., Gjæring av karbohydrater resultater i forsuring av medium (f.eks., laktose i MacConkey-Agar eller Sukrose i TCBS), og en falsk negativ oksidase test kan føre til hvis de omkringliggende pH er under 5.1. Subinoculation på Næringsrik Agar er nødvendig før oksidase test kan utføres.

    Under identifisering av mistenkte Vibrio cholerae isolere, det er ikke mulig å utføre en oksidase test direkte fra en TCBS kultur fordi syre som produseres av sukrose gjæring kolonier vil hemme oksidase reaksjon.,

    Oksidase testresultater

    Bakteriell arter karakterisert som oksidase positive inkluderer Neisseria og Pseudomonas etc. Slektene i familien Enterobacteriaceae er karakterisert som oksidase negative.

    Navnet på Oksidase positive bakterier er: Mneomoics for Oksidase Positive Organismer – PVNCH (Det er bare et akronym inspirert av den berømte mneomonic for Urease Positive organismer-PUNCH)

    1. P: Pseudomonas spp
    2. V: Vibrio cholerae
    3. N: Neisseria spp
    4. C: Campylobacter spp
    5. H: Helicobacter spp/ Haemophilus spp.,
    6. Aeromonas spp
    7. Alcaligens

    Legg igjen en kommentar

    Din e-postadresse vil ikke bli publisert. Obligatoriske felt er merket med *