Cell telle er en integrert del av å bestemme celle konsentrasjoner for plating i kultur, bestemme celleviabilitet, og å vurdere resultatene av cellen isolasjon prosedyrer. Det er anbefalt å utføre en innledende celletall før celle isolasjon, og dette tallet kan så sammenlignes med den celletall etter celleisolasjon å beregne celle recovery., I tillegg levedyktig celle teller bør utføres når en nedgang i celleviabilitet som kan forventes for eksempel, når du arbeider med cryopreserved celler eller celler manipulert ex vivo.
Celle teller kan utføres ved hjelp av Trypan Blå eller 3% Eddiksyre med Methylene Blå. Når du utfører en total nucleated blodceller, 3% Eddiksyre med Methylene Blå anbefales. Eddiksyre lyserer cellulære membraner, og methylene blå flekker eksponert kjerner. Fordi modne røde blodlegemer mangel kjerner, de er utelukket ved telling., Alternativt, Trypan Blå er anbefalt for telling levedyktig mammalske celler. Trypan Blå trenger cellemembranen, slik at det går inn i cytoplasma av celler med nedsatt membraner (døde celler) farging av dem blå. Den levende celler forblir intakt og kan skilles fra døde celler ved sin evne til å utelukke blått fargestoff. I dette tilfellet ville man telle intakt levedyktige celler.
Denne protokollen beskriver hvordan du utfører total nucleated celle teller med 3% Eddiksyre med Methylene Blå, og hvordan du utfører levedyktig celle teller ved Trypan Blått fargestoff eksklusjon., Tilleggs celle teller ressurser og maler for å hjelpe deg med å effektivisere din analysene er også tilgjengelig.