Il test dell’ossidasi viene utilizzato per identificare i batteri che producono il citocromo c ossidasi, un enzima della catena di trasporto degli elettroni batterici. Quando presente, il citocromo c ossidasi ossida il reagente (tetrametil-p-fenilendiammina) a (indofenoli) colore viola prodotto finale. Quando l’enzima non è presente, il reagente rimane ridotto ed è incolore.,
Tutti i batteri che sono ossidasi-positivi di aerobica, e può utilizzare l’ossigeno come accettore di elettroni terminale nella respirazione. Questo NON significa che siano aerobi rigorosi., I batteri che sono ossidasi-negativi possono essere anaerobici, aerobici o facoltativi; il risultato negativo ossidasi significa solo che questi organismi non hanno il citocromo c ossidasi che ossida il reagente di prova. Possono respirare usando altre ossidasi nel trasporto di elettroni.
Scopo del test dell’ossidasi
Il test dell’ossidasi è più utile nello screening delle colonie sospettate di essere una delle Enterobacteriaceae (tutte negative) e nell’identificazione delle colonie sospettate di appartenere ad altri generi come Aeromonas, Pseudomonas, Neisseria, Campylobacter e Pasteurella (positive).,
Requisiti di prova per il test ossidasi: carta da filtro umida con substrato (1% tetrametil-p-fenilendiammina dicloridrato), o disco di carta preparato commercialmente, filo di legno o filo di platino.,
risultati Attesi di test dell’Ossidasi
- Positivo: Sviluppo di colore viola scuro (indophenols) entro 10 secondi
- Negativo: Assenza di colore
Modificato Test dell’Ossidasi (Microdase): linea di Principio, Procedura e Usa
il Controllo di Qualità del Test dell’Ossidasi
specie Batteriche mostrando reazioni positive e negative devono essere eseguiti dei controlli a intervalli frequenti. I seguenti sono suggeriti:
A. Controllo positivo: Pseudomonas aeruginosa
B.,con pavimenti in parquet o platino anello e striscio nel filtro di carta
accorgimento da adottare durante l’esecuzione di test dell’ossidasi:
- non usare Nichel-lega a base di fili contenenti cromo e ferro da stiro (nicromo) per scegliere la colonia e fare striscio come questo può dare risultati falsi positivi
- Interpretare i risultati entro 10 secondi, il tempo è un fattore critico
Nota:
Il test dell’ossidasi deve essere eseguita dal 5% sheep blood agar o altro mezzo senza zuccheri fermentescibili., La fermentazione dei risultati del carboidrato nell’acidificazione del medium (per esempio, il lattosio in agar di MacConkey o il saccarosio in TCBS) e una prova falsa negativa dell’ossidasi può risultare se il pH circostante è inferiore a 5,1. La subinoculazione sull’agar nutriente è richiesta prima che il test dell’ossidasi possa essere eseguito.
Durante l’identificazione del sospetto isolato di Vibrio cholerae, non è possibile eseguire un test di ossidasi direttamente da una coltura di TCBS perché l’acido prodotto dalle colonie di fermentazione del saccarosio inibirà la reazione di ossidasi.,
Risultati dei test di ossidasi
I generi batterici caratterizzati come ossidasi positivi includono Neisseria e Pseudomonas ecc. I generi della famiglia Enterobacteriaceae sono caratterizzati come ossidasi negativa.
il Nome del Ossidasi positivi batteri sono: Mneomoics per Ossidasi Positivi Organismi – PVNCH (È solo un acronimo ispirato al famoso mneomonic dell’Ureasi Positivo organismi-PUNCH)
- P: Pseudomonas spp
- V: Vibrio cholerae
- N: Neisseria spp
- C: Campylobacter spp
- H: Helicobacter spp/ Haemophilus spp.,
- Aeromonas spp
- Alcaligens