esetjelentés
egy 56 éves, diabetes mellitusban szenvedő férfi lábfertőzés miatt került a sebészeti osztályba. A tályog lebontása után a kisülést a mikrobiológiai laboratóriumba küldték tenyésztésre.
a purulens anyag közvetlen mikroszkópos vizsgálata leukocitákat és gram-pozitív coccusokat mutatott. Az éjszakai inkubáció után az 5% – os juhvér agar tenyésztése sima, emelt, csillogó, szürkésfehér, béta-hemolitikus kolóniákat eredményezett., A kolóniák Gram-foltos kenete Gram-pozitív cocci-t mutatott a klaszterekben. Az üveglemezen 3% H2 O2-vel végzett katalázvizsgálat ismételten negatív volt. A kataláznegativitás ellenére a koaguláz-termelést csőkoaguláz-teszttel, a Dnaáz-tesztet pedig Dnaáz-közegben tesztelték, és pozitívak voltak, azonosítva a szervezetet S. aureus-ként. A jelenlegi törzs különbözik a Staphylococcus saccharolyticus-tól és a Staphylococcus aureus subsp-től. anaerobius csomósodási faktor, trehalózból, mannózból, laktóz-és nitrátcsökkentésből származó savtermelés (4) révén.,
az izolátum S. aureus subsp-ként való azonosítása. az aureust a nuc és a fem gének PCR-amplifikációja igazolta (5). A katalázaktivitás hiányáért felelős mechanizmus azonosítása érdekében az S. aureus kataláz gén nukleotidszekvenciáját a kataláz-negatív törzsben PCR-vel erősítették primerek, Cat1 5′ ATAAATTGTGGAGGGATGATGAT3′ és Cat 2 5 ‘TCATAAAACTGCTCAACTACGC3’ (3) segítségével.
Az S. aureus teljes DNS−ét cetil-trimetil-ammónium-bromid módszerrel extrahálták, miután a baktériumokat lizosztafinnal (1 mg ml-1) 37°C-on 1 órán át Tris/EDTA/szacharózban előkezelték., A PCR-t 50 µl térfogatban végezték, amely 50 ng genomikus DNS-t tartalmaz a gyártó (Roche, Németország) által szolgáltatott reagensekkel és protokollokkal. Thermo cikler reakció feltételek voltak 1 perc. 94°C-on 1 perc. 52°C-on és 1 vagy 1,5 perc 72°C-on 30 cikluson keresztül. Minden PCR-erősítés magában foglalta az előzetes denaturációt 94°C-on 10 percig, a végső inkubációt pedig 72°C-on 10 percig. Az amplifikált PCR termékeket elektroforézissel elemeztük 1% agaróz géleken. A PCR eredmény megerősítette, hogy ez az izolátum kataláz-negatív S. aureus törzs.,
az izolátum antibiotikumokra való érzékenységét a CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) iránymutatásai (6) szerint lemezdiffúziós módszerrel határozták meg. A törzs volt, érzékeny imipenem, chloramphenicol, amoxicillin, vancomycin szemben ellenálló oxacillin, penicillin, ceftriaxon, eritromicin, clindamycin, valamint amikacin.
a kataláz-negatív S. aureus Izolátumai rendkívül ritkák. Csak néhány kataláz-negatív S. aureus törzsről számoltak be (4, 7). A kataláz egy hem fehérje enzim, amely lebontja a fagociták által termelt hidrogén-peroxidot., A kataláz előállítása nem tűnik elengedhetetlennek az S. aureus in vitro és in vivo (4, 8) növekedéséhez, de ez egy védekező mechanizmus a mikroorganizmus fagocitikus sejtekben történő elpusztítása ellen (2). Másrészt jó korreláció van a staphylococcus kataláz aktivitás és az egér letalitása között (8). Ez magyarázhatja a kataláz negatív S. aureus törzsek által okozott fertőzés alacsony gyakoriságát.
a kataláz-negatív S. aureus törzsek klinikai jelentősége további vizsgálatot igényel. A korábbi jelentések, a kataláz-negatív S., az aureus törzseket vérmintákból, katéterekből, bronchiális szekréciós mintákból, fekélyekből és egyéb fertőzésekkel vagy nozokomiális endemikával (9-11) összefüggő sebekből izolálták. A kataláz-negatív S. aureus valódi előfordulási gyakorisága azonban nem ismert, mivel sok diagnosztikai laboratórium nem végzi el a kataláz tesztet, hanem Gram-foltot, gyarmati morfológiát, koaguláz tesztet és más biokémiai teszteket használ az S. aureus azonosítására., Következésképpen a klinikusokat és a mikrobiológusokat ösztönözni kell arra, hogy azonosítsák és jelentsék ezeket az atipikus törzseket és a hozzájuk kapcsolódó fertőzéseket, hogy megállapítsák szerepüket a patogenezisben.