G-Protein-kapcsolt receptorok
g-protein-kapcsolt receptorok (GPCRs) reagálnak az extracelluláris ingerekre, mint a hormonok, egy g-fehérjével való kölcsönhatás révén, a membránon keresztül a sejt belsejébe transzducálva a jelet. A GPCR aktiválása után a Ga-alegységek megkötik a GTP-t és aktívvá válnak, tovább aktiválva a downstream jelátviteli tényezőket, mint például a ciklikus AMP-t (cAMP) szintetizáló adenilil-cikláz (AC) enzimet., Az aktivált G-fehérjék kölcsönhatásba lépnek a downstream jelátviteli tényezőkkel, hogy megváltoztassák a második hírvivők, például az inozitolfoszfátok, a kalcium és a cAMP termelését. A ga alegységek Gi-osztályát aktiváló GPCRs gátolja a táborgyártást és a ga alegységek Gs-osztályát aktiváló GPCRs aktiválja a táborgyártást. a tábor viszont aktiválja a táborfüggő protein kinázt, a protein kináz A-t (PKA). A PKA aktiválási útvonal egy példa egy jelátviteli kaszkádra, amelyben több jelátviteli esemény összekapcsolása erősíti az eredeti jelet a cellában., Minden aktivált GPCR-molekula esetében sok g-fehérje aktiválható, és minden aktív G-protein sok cAMP-molekulát képes szintetizálni, folytatva a kaszkádot a PKA-ra és tovább.
a gpcr-k nagymértékben részt vesznek a pituicyte funkciókban. A hipofízis adenomákban károsodott jelátvitelt mutattak ki. GSA pont mutációkat mutattak ki a GH-szekretáló hipofízis tumorokban .
Pertuit et al. széles körben elemezték a GSA változásait a GH-szekretáló adenomákban.
az eddig egyértelműen azonosított és a GH-szekretáló tumorok 30-40% – ában megfigyelt egyetlen mutáció a GSP onkogénre vonatkozik., A GSA mRNAs nagy egyéni variációi ellenére a GSA fehérjék szintje mindig alacsonyabb a GSP pozitívban (gsp+) a GSP negatív (gsp−) daganatokhoz képest . Korábban azt javasolták, hogy a Gsa aktiválása olyan konformációs változást idéz elő, amely megakadályozza a membránokhoz való kötődését, és növeli annak lebomlási sebességét, ami magában foglalhatja a proteaszómát .
a GSP onkogén mellett a WtGsa fehérje túlzott expresszióját figyelték meg a gsp− adenomák egy részhalmazában. Ezeknek a GSP− daganatoknak körülbelül 60% – a kifejezi a GSA magas szintjét a normál emberi agyalapi mirigy sejtekhez képest., A GNAS locus (guanin nukleotid kötő fehérje (G fehérje), alfa-stimuláló tevékenység polipeptid 1), amely leképezi az emberi kromoszóma 20q13, áll egy összetett régió több alternatív használjunk, átiratok kódolás több fehérje termékek. A legtöbb emberi szövetben a GSA biallelikusan expresszálódik, de specifikus szövetekben a Gsa be van nyomva . A hipofízis tumorokban a Gsa-kódoló transzkriptumok monoallelikusan expresszálódnak, elsősorban az anyai allélból . A GSP+ szomatotroph adenomák szinte minden esetben a GNAS-aktiváló mutáció az aktív anyai allélon fordul elő ., Köztudott, hogy a genomiális imprinting diszregulációk hatással lehetnek a gén expressziós szintekre, így részt vehetnek a tumorigenezisben. Erős imprinting relaxációt, a GSA apai eredetű expressziójával, csak gsp− daganatokban találtak. Így továbbra is meg kell határozni azokat a mechanizmusokat, amelyek figyelembe vehetik a WtGsa túlexpresszióját.
GS fehérjék pár hormonális stimuláció különböző sejtfelszíni receptorok aktiválása AC . Az AC aktiválás az intracelluláris második messenger tábor kialakulásához vezet, amely stimulálja a PKA-t, a fő cAMP effektorot., A foszfodiészterázok (PDEs) hozzájárulnak a tábor útvonalának komplexitásához és specifikusságához a tábor hidrolizálásával. Most már jól megalapozott, hogy a tábor a sejtekben van felosztva. A tábor emelkedésére adott válaszként a PDEs közvetlenül aktiválható PKA-val (azaz gyors visszacsatolási szabályozás) és / vagy PDE gén transzkripció indukciójával (azaz hosszú távú szabályozás) . Így a spatiotemporális egyensúly a PKA és a PDE tevékenységek között meghatározó szerepet játszik a tábor jelzésének irányításában.,
PDE inhibitorok hiányában a GSP+ és a GSP− adenomák között nem volt kimutatható különbség az intracelluláris cAMP szintekben . Persani et al. kimutatták, hogy a PDE4C és a 4D, valamint a PDE8 transzkripciói túlexpresszáltak a GSP+ tumorokban , amelyek korreláltak a PDE aktivitás hétszeres növekedésével. A két nukleáris fehérje, a CREB fehérje és az indukálható cAMP early repressor (ICHER) a cAMP fő és legjobban jellemzett végső célpontjai. A transzkripciós faktorok mRNS-szintje a CREB és az ICHER esetében egyaránt emelkedik a GSP+ tumorokban ., A foszforilált Kreb szintek hasonlóak a kétféle daganatban, bár a PDE blokád a P-CREB (Foszfocreb) növekedését indukálja a GSP+ daganatokban. Ezek az eredmények arra utalnak, hogy a PDE aktivitás növekedése ellensúlyozhatja a cAMP útvonal aktiválódását, és hatással lehet a GSP+ tumorok fenotípusára .
a változtatások Mellett, a tábor út a gsp+ daganatok, több sor bizonyítékot is azt sugallják, hogy létezik tábor út változások GH-termelő adenoma overexpressing WtGsa. Néhány gsp− daganatban viszonylag magas Kreb-vagy ICER-mRNS-szinteket figyeltek meg .,
a WtGsa túlzott expressziója fokozza az intracelluláris tábor felhalmozódását és serkenti a tábor útvonalát (P-CREB szint). A Kreb-függő transzkripció növekedését figyelték meg mind a GSP onkogén jelenlétében, mind a WTGSA túlzott expressziójával a GH3 sejtekben .
annak érdekében, hogy pontosan meghatározzuk a Gsa-változások szerepét a GH-szekretáló adenomák, Pertuit et al., az agyalapi mirigy sejtjein végzett tanulmány megállapította, hogy a GSP onkogén expressziójának indukciója jelentősen növeli az AC aktivitást, ami az intracelluláris tábor szintjének emelkedésével jár. A wtgsa túlzott expressziójára adott válaszként megfigyelhető az AC gyenge, de tartós aktiválása, amely a tábor szintjének enyhe emelkedésével jár. a tábor fokozatosan csökken a folyamatos transzgén expresszió ellenére, ami a PDEs potenciális bevonására utal., Ez a GSP onkogén poszttranszkripciós szabályozása mellett egy második visszacsatolási mechanizmust is jelenthet .
ezek a mutációk gátolják a GSA GTPase aktivitását, ami a cAMP GHRH ligand-független konstitutív aktiválódását eredményezi, ami GH-transzkripciós aktivációt és szomatotroph proliferációt eredményez a GH promoter CREB-jén keresztül .
Jelentősen nagyobb mennyiségű Ser133phosphorylated, ezért aktív CREB számoltak be néhány GH-termelő hypophysis daganatok képest a szinten található funkcionális (NF) daganatok., Ez a kibővített CREB aktivitás még olyan daganatokban is nyilvánvaló volt, amelyek nem mutattak ki GSA mutációt. Ez arra utal, hogy a CREB aktiválása Gs-független mechanizmuson keresztül történhet . Lehetséges, hogy a hypothalamus és a perifériás endokrin szervek által felszabaduló stimuláló/gátló polipeptidek és szteroid hormonok megváltoztathatják az agyalapi mirigy gén expresszióját és hormonszekrécióját .