A Sejtszámolás szerves része a sejtkoncentrációk meghatározásának a tenyészetben történő bevonáshoz, a sejtek életképességének meghatározásához és a sejtszigetelési eljárások eredményeinek értékeléséhez. Javasoljuk, hogy végre egy kezdeti sejtszám előtt sejt izolálása; ez a szám ezután össze lehet hasonlítani a sejtszám után sejt izolálás kiszámításához sejt hasznosítás., Ezenkívül életképes sejtszámokat kell végezni, ha a sejtek életképességének csökkenése várható, például krioprezervált sejtekkel vagy ex vivo manipulált sejtekkel végzett munka során.
A Sejtszámolást Tripánkék vagy 3% ecetsav metilénkék alkalmazásával lehet elvégezni. A teljes nukleált sejtszám végrehajtásakor 3% ecetsav metilénkék ajánlott. Az ecetsav lizálja a sejtmembránokat,a metilénkék pedig a kitett magokat. Mivel az érett vörösvérsejtek nem rendelkeznek magokkal, számolás közben kizárják őket., Alternatív megoldásként a Trypan Blue ajánlott életképes emlős sejtek számolására. A Trypan Kék behatol a sejtmembránba, így belép a sérült membránokkal (halott sejtekkel) rendelkező sejtek citoplazmájába, hogy kék színűvé tegye őket. Az élő sejtek érintetlenek maradnak, és megkülönböztethetők az elhalt sejtektől azáltal, hogy képesek kizárni a kék festéket. Ebben az esetben az ép életképes sejteket számoljuk.
Ez a protokoll leírja, hogyan lehet A teljes nukleált sejtszámot 3% – os ecetsavval metilénkék színnel elvégezni, és hogyan lehet életképes sejtszámokat végrehajtani a Trypan kék festék kizárásával., Additonal cell counting resources and Sablons to help streamline your assays are also available.