Solu laskenta on olennainen osa määritetään solun pitoisuudet pinnoitus kulttuuri, määritetään solujen elävyys, ja tulosten arvioimiseksi solujen eristämistä koskevat menettelyt. On suositeltavaa suorittaa ensimmäinen solumäärä ennen solun eristämistä; tätä lukua voidaan sitten verrata solumäärään solun eristämisen jälkeen solujen palautumisen laskemiseksi., Lisäksi, elinkykyisten solujen määrää tulisi suorittaa, kun lasku solujen elävyys voidaan olettaa, esimerkiksi, kun työskennellään kylmäsäilytetyt solut tai solut manipuloitu ex vivo.
Solulaskenta voidaan suorittaa Trypansinisellä tai 3-prosenttisella etikkahapolla metyleenisinisellä. Nukleoitujen solujen kokonaismäärää suoritettaessa suositellaan 3% etikkahappoa metyleenisinisellä. Etikkahappo lysyttää solukalvot, ja metyleenisininen värjää altistuneet ytimet. Koska kypsistä punasoluista puuttuu ytimet, ne jätetään laskennan ulkopuolelle., Vaihtoehtoisesti trypansinistä suositellaan elinkykyisten nisäkässolujen laskemiseen. Trypan Blue tunkeutuu solukalvon, jolloin se siirtyy solujen sytoplasmassa, joilla on heikentynyt kalvot (kuolleita soluja) värjää ne siniseksi. Elävät solut pysyvät ehjinä ja voidaan erottaa kuolleista soluista niiden kyvyllä sulkea sininen väriaine pois. Tällöin lasketaan ehjät elinkelpoiset solut.
tässä pöytäkirjassa kuvataan, miten nukleoitujen solujen kokonaismäärä suoritetaan 3% etikkahapolla metyleenisinisellä ja miten elinkykyiset solumäärät suoritetaan Trypaanisinisen väriaineen poissulkemisen avulla., Saatavilla on myös Additonal cell counting-resursseja ja malleja, jotka auttavat virtaviivaistamaan määrityksiä.

Vastaa

Sähköpostiosoitettasi ei julkaista. Pakolliset kentät on merkitty *