FALLBERICHT
Ein 56-jähriger Mann mit Diabetes mellitus wurde aufgrund einer Fußinfektion in die Operationsstation eingeliefert. Nach dem Debridement eines Abszesses wurde die Entladung in das mikrobiologische Labor für Kultur geschickt.
Die direkte mikroskopische Untersuchung des eitrigen Materials zeigte Leukozyten und grampositive Kokken. Kultur auf 5% Schafsblutagar nach nächtlicher Inkubation ergab glatte, erhöhte, glitzernde, grau-weiße, beta-hämolytische Kolonien., Der grambefleckte Abstrich der Kolonien zeigte grampositive Kokken in Clustern. Der Katalasetest, der mit 3% H2 O2 auf einem Glasschieber durchgeführt wurde, war wiederholt negativ. Trotz der Katalasenegativität wurde die Koagulaseproduktion durch einen Röhrenkoagulase-Test getestet, und der DNAase-Test wurde auf DNAase-Medium durchgeführt und war positiv, wobei der Organismus als S. aureus identifiziert wurde. Der vorliegende Stamm unterscheidet sich von Staphylococcus saccharolyticus und Staphylococcus aureus subsp. anaerobius durch seine Produktion von Verklumpungsfaktor, Säureproduktion aus Trehalose, Mannose und Laktose und Nitratreduktion (4).,
Die Identifizierung des Isolats als S. aureus subsp. aureus wurde durch PCR-Amplifikation der Nuc-und fem-Gene bestätigt (5). Um den Mechanismus zu identifizieren, der für die fehlende Katalaseaktivität verantwortlich ist, wurde die Nukleotidsequenz des S. aureus-Katalase-Gens im Katalase-negativen Stamm durch PCR unter Verwendung eines Satzes von Primern, Cat1 5′ TATAAATTGTGGAGGGATGAT3′ und Cat 2 5 ‚TATCATAAACTGCTCAACTACGC3‘ (3), amplifiziert.
Die gesamte DNA von S. aureus wurde nach Vorbehandlung von Bakterien mit Lysostaphin (1 mg ml−1) für 1 h bei 37°C in Tris/EDTA/Saccharose nach der Cetyltrimethylammoniumbromid-Methode extrahiert., Die PCR wurde in einem Volumen von 50 µl mit 50 ng genomischer DNA mit Reagenzien und Protokollen des Herstellers (Roche, Deutschland) durchgeführt. Thermo Cycler Reaktionsbedingungen waren 1 min. bei 94°C, 1 min. bei 52°C und 1 oder 1,5 min bei 72°C für 30 Zyklen. Alle PCR-Amplifikationen beinhalteten eine vorläufige Denaturierung bei 94°C für 10 min und eine abschließende Inkubation bei 72°C für 10 min. Amplifizierte PCR-Produkte wurden durch Elektrophorese auf 1% Agarose-Gele analysiert. PCR-Ergebnis bestätigt, dass dieses Isolat ein Katalase-negativer S. aureus-Stamm ist.,
Die Empfindlichkeit von Isolat gegenüber Antibiotika wurde mittels Disk Diffusionsmethode nach CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) Guidelines (6) bestimmt. Es wurde festgestellt, dass der Stamm gegenüber Imipenem, Chloramphenicol, Amoxicillin, Vancomycin empfindlich und gegen Oxacillin, Penicillin, Ceftriaxon, Erythromycin, Clindamycin und Amikacin resistent ist.
Isolate von Katalase-negativem S. aureus sind extrem selten. Es wurden nur wenige katalase-negative S. aureus-Stämme berichtet (4, 7). Katalase ist ein Häm-Protein-Enzym, das von Phagozyten produziertes Wasserstoffperoxid zersetzt., Die Produktion von Katalase scheint für das Wachstum von S. aureus in vitro und in vivo nicht wesentlich zu sein (4, 8), ist jedoch ein Abwehrmechanismus gegen die Zerstörung des Mikroorganismus in phagozytischen Zellen (2). Andererseits besteht eine gute Korrelation zwischen der Staphylokokken-Katalase-Aktivität und ihrer Letalität bei Mäusen (8). Dies kann die geringe Infektionshäufigkeit erklären, die durch Katalase-negative S. aureus-Stämme verursacht wird.
Die klinische Relevanz von Katalase-negativen S. aureus-Stämmen erfordert weitere Untersuchungen. In früheren berichten, die Katalase-negative S., aureus-Stämme wurden aus Blutproben, Kathetern, Bronchialsekretionsproben, Geschwüren und anderen Wunden im Zusammenhang mit Infektionen oder nosokomialen Endemien isoliert (9-11). Die wahre Inzidenz von katalasenegativem S. aureus ist jedoch unbekannt, da viele Diagnoselabors den Katalasetest nicht durchführen, sondern Gram-Tests, Kolonialmorphologie, den Koagulasetest und andere biochemische Tests zur Identifizierung von S. aureus verwenden., Abschließend müssen Kliniker und Mikrobiologen ermutigt werden, diese atypischen Stämme und die damit verbundenen Infektionen zu identifizieren und zu melden, um ihre Rolle bei der Pathogenese festzustellen.