Die oxidase test ist verwendet zu identifizieren bakterien, die produzieren cytochrom c oxidase, ein enzym der bakterielle elektronen transport kette. Wenn vorhanden, oxidiert die Cytochrom-c-Oxidase das Reagenz (Tetramethyl-p-Phenylendiamin) zu (Indophenolen) purpurfarbenem Endprodukt. Wenn das Enzym nicht vorhanden ist, bleibt das Reagenz reduziert und ist farblos.,
Alle oxidase-positiven Bakterien sind aerob und können Sauerstoff als terminalen Elektronenakzeptor in der Atmung verwenden. Dies bedeutet NICHT, dass sie strenge Aerobes sind., Bakterien, die Oxidase-negativ sind, können anaerob, aerob oder fakultativ sein; Das Oxidase-negative Ergebnis bedeutet nur, dass diese Organismen nicht über die Cytochrom-c-Oxidase verfügen, die das Testreagenz oxidiert. Sie können mit anderen Oxidasen im Elektronentransport atmen.
Zweck des Oxidase-Tests
Der Oxidase-Test ist am hilfreichsten beim Screening von Kolonien, bei denen der Verdacht besteht, eine der Enterobacteriaceae zu sein (alle negativ), und bei der Identifizierung von Kolonien, bei denen der Verdacht besteht, zu anderen Gattungen wie Aeromonas, Pseudomonas, Neisseria, Campylobacter und Pasteurella (positiv) zu gehören.,
Prüfanforderungen für Oxidase-Test: Feuchtes Filterpapier mit dem Substrat (1% Tetramethyl-p-Phenylendiamindihydrochlorid) oder handelsüblich hergestellte Papierscheibe, Holzdraht oder Platindraht.,
Erwartete Ergebnisse des Oxidase-Tests
- Positiv: Entwicklung dunkelvioletter Farbe (Indophenole) innerhalb von 10 Sekunden
- Negativ: Farblosigkeit
Modifizierter Oxidase-Test (Mikrodase): Prinzip, Verfahren und Verwendungen
Qualitätskontrolle des Oxidase-Tests
Bakterienarten, die positive und negative Reaktionen zeigen, sollten in regelmäßigen Abständen als Kontrollen durchgeführt werden. Es wird Folgendes vorgeschlagen:
A. Positive Kontrolle: Pseudomonas aeruginosa
B.,mit holz oder platin schleife und abstrich in die filter papier
Vorsichtsmaßnahmen getroffen werden, während durchführung oxidase test:
- Verwenden Sie nicht Nickel-basis legierung drähte enthalten chrom und eisen (nichrom) zu pick die kolonie und machen abstrich als diese kann geben falsch positive ergebnisse
- Interpretieren die ergebnisse innerhalb von 10 sekunden, timing ist kritisch
Hinweis:
Der Oxidase-Test muss aus 5% Schafsblutagar oder einem anderen Medium ohne fermentierbaren Zucker durchgeführt werden., Die Fermentation von Kohlenhydraten führt zu einer Versauerung des Mediums (z. B. Lactose in MacConkey-Agar oder Saccharose in TCBS), und ein falsch negativer Oxidase-Test kann zu einem falsch negativen Oxidase-Test führen, wenn der umgebende pH-Wert unter 5.1 liegt. Eine Subinokulation auf Nährstoff-Agar ist erforderlich, bevor der Oxidase-Test durchgeführt werden kann.
Bei der Identifizierung des vermuteten Vibrio-Cholerae-Isolats ist es nicht möglich, einen Oxidase-Test direkt aus einer TCBS-Kultur durchzuführen, da die von den Saccharose-fermentierenden Kolonien produzierte Säure die Oxidase-Reaktion hemmt.,
Oxidase test ergebnisse
Bakterielle gattungen charakterisiert als oxidase positive umfassen Neisseria und Pseudomonas etc. Gattungen der Enterobacteriaceae-Familie sind als Oxidase-negativ gekennzeichnet.
Name der Oxidase-positiven Bakterien sind: Mneomoics für Oxidase-Positive Organismen – PVNCH (Es ist nur ein Akronym, inspiriert von der berühmten mneomonic für Urease-Positive Organismen-PUNCH -)
- P: Pseudomonas spp
- V: Vibrio cholerae
- N: Neisseria spp
- C: Campylobacter spp
- H: Helicobacter spp/ Haemophilus spp.,
- Aeromonas spp
- Alcaligens