CASE REPORT
en 56-årig mand med diabetes mellitus blev indlagt på operationsafdelingen på grund af fodinfektion. Efter debridering af en abscess blev udledningen sendt til mikrobiologilaboratoriet for kultur.
direkte mikroskopisk undersøgelse af det purulente materiale viste leukocytter og gram-positive cocci. Kultur på 5% fårblodagar efter natten over inkubation gav glatte, hævede, glinsende, gråhvide, beta-hæmolytiske kolonier., Koloniernes Gram-farvede udstrygning afslørede gram-positive kokker i klynger. Katalasetesten udført med 3% H2 O2 på et glasglas var gentagne gange negativ. På trods af katalase-negativiteten blev koagulaseproduktion testet ved en rørkoagulase-test, og DNAase-test blev udført på DNAase-medium og var positiv, idet organismen blev identificeret som S. aureus. Den nuværende stamme adskiller sig fra Staphylococcus saccharolyticus og Staphylococcus aureus subsp. anaerobius ved sin produktion af sammenklumpningsfaktor, syreproduktion fra trehalose, mannose og lactose og nitratreduktion (4).,
identifikationen af isolatet som S. aureus subsp. aureus blev bekræftet ved PCR-amplifikation af NUC-og fem-generne (5). For at identificere den mekanisme, der er ansvarlig for manglende katalase aktivitet, nukleotid sekvens af S. aureus katalase-genet i katalase-negative pres blev forstærket ved PCR ved hjælp af et sæt primere, Cat1 5’TATAAATTGTGGAGGGATGAT3′ og Cat 2 5’TCATAAACTGCTCAACTACGC3′ (3).
totalt DNA fra S. aureus blev ekstraheret ved cetyltrimethylammoniumbromid−metoden efter forbehandling af bakterier med lysostaphin (1 mg ml-1) i 1 time ved 37.C i Tris/EDTA / saccharose., PCR blev udført i et 50 µl volumen indeholdende 50 ng genomisk DNA med reagenser og protokoller leveret af producenten (Roche, Tyskland). Termo cycler reaktionsbetingelser var 1 min. ved 94 C C, 1 min. ved 52 and C og 1 eller 1,5 min ved 72.C i 30 cyklusser. Alle PCR-amplifikationer omfattede foreløbig denaturering ved 94.C i 10 minutter og en endelig inkubation ved 72. C i 10 minutter. Amplificerede PCR-produkter blev analyseret ved elektroforese på 1% agarosegeler. PCR-resultat bekræftede, at dette isolat er en katalase-negativ S. aureus-stamme.,
isolatets følsomhed over for antibiotika blev bestemt ved anvendelse af diskdiffusionsmetode i henhold til CLSI (clinical and Laboratory Standards Institute) retningslinjer (6). Den stamme, blev fundet til at være følsomme over for imipenem, chloramphenicol, amoxicillin, vancomycin og modstandsdygtig over for oxacillin, penicillin, ceftriaxon, erythromycin, clindamycin, og amikacin.isolater af katalase-negativ S. aureus er yderst sjældne. Der er kun rapporteret nogle få katalase-negative S. aureus-stammer (4, 7). Katalase er et hæmproteinen .ym, der nedbryder hydrogenpero .id produceret af fagocytter., Produktionen af katalase ser ikke ud til at være væsentlig for væksten af S. aureus in vitro og in vivo (4, 8), men det er en forsvarsmekanisme mod ødelæggelse af mikroorganismen i fagocytiske celler (2). På den anden side er der god sammenhæng mellem stafylokokkatalaseaktivitet og dens dødelighed hos mus (8). Dette kan forklare den lave frekvens af infektion forårsaget af katalase negativ S. aureus stammer.
den kliniske relevans af katalase-negative S. aureus-stammer kræver yderligere undersøgelse. I tidligere rapporter, katalase-negative S., aureus-stammer blev isoleret fra blodprøver, katetre, bronchiale sekretionsprøver, mavesår og andre sår forbundet med infektioner eller nosokomiale endemier (9-11). Imidlertid, den sande forekomst af katalase-negativ S. aureus er ukendt, fordi mange diagnostiske laboratorier ikke udfører katalase-testen, men bruger Gram-plet, kolonial morfologi, koagulase-testen, og andre biokemiske test til identifikation af S. aureus., Afslutningsvis skal klinikere og mikrobiologer opfordres til at identificere og rapportere disse atypiske stammer og de infektioner, der er forbundet med dem, for at etablere deres rolle i patogenese.