ZPRÁVA
56-rok-starý muž s diabetes mellitus byl přijat na chirurgické oddělení v důsledku infekce nohou. Po odstranění abscesu byl výtok odeslán do mikrobiologické laboratoře pro kulturu.
přímé mikroskopické vyšetření purulentního materiálu ukázalo leukocyty a gram-pozitivní koky. Kultura na 5% agaru ovčí krve po noční inkubaci přinesla hladké, zvýšené, lesknoucí se, šedobílé, beta-hemolytické kolonie., Gram-mořený nátěr kolonií odhalil gram pozitivní koky ve shlucích. Katalázový test provedený s 3% H2 O2 na skleněném skluzu byl opakovaně negativní. Navzdory kataláza negativní, koaguláza výroby byl testován trubice koaguláza test a DNAase test byl proveden na DNAase střední a byly pozitivní, identifikace organismu jako S. aureus. Tento kmen se liší od Staphylococcus saccharolyticus a Staphylococcus aureus subsp. anaerobius produkcí shlukovacího faktoru, produkce kyseliny z trehalózy, manózy a redukce laktózy a dusičnanů (4).,
identifikace izolátu jako s. aureus subsp. aureus byl potvrzen PCR amplifikací genů nuc a fem (5). Identifikovat mechanismus zodpovědný za nedostatek aktivity katalasy, nukleotidové sekvence S. aureus kataláza genu v kataláza-negativní kmen byl amplifikován pomocí PCR za použití sady primerů, Cat1 5’TATAAATTGTGGAGGGATGAT3′ a Kočka 2 5’TCATAAACTGCTCAACTACGC3′ (3).
Celková DNA z S. aureus byla extrahována cetyl trimethyl ammonium bromid metoda po předčištění bakterie s lysostaphin (1 mg ml−1) po dobu 1 h při 37°C v Tris/EDTA/sacharóza., PCR bylo provedeno v objemu 50 µl obsahujícím 50 ng genomovou DNA s činidly a protokoly dodanými výrobcem (Roche, Německo). Podmínky termo cyklické reakce byly 1 min. při 94°C, 1 min. při 52°C a 1 nebo 1,5 min při 72°C po dobu 30 cyklů. Všechny PCR zesilovače zahrnovaly předběžnou denaturaci při 94 ° C po dobu 10 minut a konečnou inkubaci při 72°C po dobu 10 minut. Zesílené PCR produkty byly analyzovány elektroforézou na 1% agarózových gelech. Výsledek PCR potvrdil, že tento izolát je katalázově negativní kmen s.aureus.,
citlivost izolátu na antibiotika byla stanovena metodou difúze disku podle pokynů clsi (Clinical and Laboratory Standards Institute) (6). Bylo zjištěno, že kmen je citlivý na imipenem, chloramfenikol, amoxicilin, vankomycin a je odolný vůči oxacilinu, penicilinu, ceftriaxonu, erythromycinu, klindamycinu a amikacinu.
izoláty katalázově negativního s. aureus jsou extrémně vzácné. Bylo hlášeno pouze několik katalázově negativních kmenů s. aureus (4, 7). Kataláza je proteinový enzym hemu, který rozkládá peroxid vodíku produkovaný fagocyty., Produkce katalasy se nezdá být zásadní pro růst S. aureus in vitro a in vivo (4, 8), ale to je obranný mechanismus proti zničení mikroorganismů ve fagocytární buňky (2). Na druhé straně existuje dobrá korelace mezi aktivitou stafylokokové katalázy a její letalitou u myši (8). To může vysvětlit nízkou frekvenci infekce způsobené kataláza negativní kmeny S. aureus.
klinický význam katalázově negativních kmenů s. aureus vyžaduje další vyšetření. V předchozích zprávách kataláza-negativní s., aureus kmeny byly izolovány ze vzorků krve, katétry, bronchiální sekrece vzorky, vředů a jiných ran spojené s infekcí nebo nozokomiální endemitů (9-11). Nicméně, skutečný výskyt kataláza-negativní S. aureus není známa, protože mnoho diagnostických laboratoří neprovádějte test kataláza ale použít Gramovo barvení, koloniální morfologie, koaguláza test, a další biochemické testy pro identifikaci S. aureus., Závěrem je třeba povzbudit lékaře a mikrobiology k identifikaci a hlášení těchto atypických kmenů a infekcí s nimi spojených, aby se zjistila jejich role v patogenezi.