Madame Lelica

Mobilní počítání je nedílnou součástí určení koncentrace buněk pro pokovování v kultuře, určení životaschopnosti buněk, a hodnocení výsledků mobilní postupy pro izolaci. Před izolací buněk se doporučuje provést počáteční počet buněk; toto číslo lze poté porovnat s počtem buněk po izolaci buněk pro výpočet obnovy buněk., Navíc, životaschopných buněk by měla být provedena, když je pokles životaschopnosti buněk, lze očekávat, že, například, při práci s kryoprezervovanými buňky nebo buňky, manipulovat ex vivo.
počítání buněk lze provést pomocí Trypan modré nebo 3% kyseliny octové s methylenovou modří. Při provádění celkového počtu nukleovaných buněk se doporučuje 3% kyseliny octové s methylenovou modří. Kyselina octová lyzuje buněčné membrány a methylenová modř skvrny exponovaných jader. Protože zralé červené krvinky postrádají jádra, jsou při počítání vyloučeny., Alternativně se Trypan Blue doporučuje pro počítání životaschopných savčích buněk. Trypanovou Modř proniká buněčnou membránou, čímž vstupuje do cytoplazmy buněk s poškozenými membránami (mrtvé buňky), aby skvrna je modrá. Živé buňky zůstávají neporušené a lze je odlišit od mrtvých buněk jejich schopností vyloučit modré barvivo. V tomto případě by se počítaly neporušené životaschopné buňky.
Tento postup popisuje, jak provést celkem nucleated buněk se počítá s 3% Kyselinou Octovou s Methylenové Modři, a jak provést životaschopných buněk tím, že Trypanovou Modré barvivo vyloučení., Additonal buňky počítání zdroje a šablony, které pomáhají zefektivnit své testy jsou také k dispozici.