Madame Lelica

a contagem de células é parte integrante da determinação das concentrações celulares para revestimento em cultura, da determinação da viabilidade celular e da avaliação dos resultados dos procedimentos de isolamento celular. Recomenda-se a realização de uma contagem inicial de células antes do isolamento das células; este número pode então ser comparado com a contagem de células após o isolamento das células para calcular a recuperação celular., Além disso, devem ser realizadas contagens de células viáveis quando se pode esperar uma diminuição da viabilidade celular, por exemplo, quando se trabalha com células criopreservadas ou células manipuladas ex vivo. a contagem de células pode ser realizada usando Azul de Trypan ou ácido acético a 3% com azul de metileno. Ao efectuar uma contagem total de células nucleadas, recomenda-se a utilização de ácido acético a 3% com azul de metileno. O ácido acético lise as membranas celulares, e o azul de metileno mancha os núcleos expostos. Uma vez que os glóbulos vermelhos maduros não possuem núcleos, são excluídos da contagem., Em alternativa, recomenda-se o Trypan Blue para a contagem de células de mamíferos viáveis. O azul-tripano penetra na membrana celular, entrando assim no citoplasma das células com membranas comprometidas (células mortas) para manchá-las de azul. As células vivas permanecem intactas e podem ser distinguidas das células mortas pela sua capacidade de excluir o corante azul. Neste caso, contaríamos as células viáveis intactas. este protocolo descreve como realizar contagem total de células nucleadas com 3% de ácido acético com azul de metileno, e como realizar contagens viáveis de células por exclusão de Corante Azul de Trípano., Também estão disponíveis recursos de contagem de células additonais e modelos para ajudar a simplificar seus testes.